普罗威登斯菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Providencia spp. Universal Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3433
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，专为普罗威登斯菌（Providencia spp.）的快速、高灵敏度检测而设计，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒包含优化的引物、预混反应液及对照品，可特异性扩增目标菌株DNA，避免与其他微生物的交叉反应。
规格与组分
PCR预混液（含SYBR Green染料）：1 mL（50次反应，40 μL体系）
普罗威登斯菌特异性引物混合液：100 μL
阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）：50 μL
核酸释放剂（试用装）：1 mL（20次样本处理）
超纯水：1 mL（稀释或对照用）
操作步骤
样本处理区
DNA提取：使用核酸释放剂或标准提取方法制备模板DNA。
加样：将模板DNA加入预混反应体系（避免气泡）。
试剂准备区
反应体系配制：按比例混合预混液、引物及模板DNA，短暂离心混匀。
核酸扩增区
PCR程序设置：
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）
熔解曲线分析：验证扩增特异性。
结果分析
定量检测：通过标准曲线计算样本DNA浓度（Ct值与log浓度线性拟合）。
定性检测：
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线典型；
阴性：Ct值≥40；
可疑结果（35<Ct<40）：需重复检测确认。
注意事项
所有组分使用前需完全融化并混匀，避光保存反应液。
严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。
实验后使用10%次氯酸或75%乙醇清洁工作台。
本试剂盒仅限科研用途，不适用于临床诊断。
储存条件
-20℃避光保存，有效期12个月（以包装标注为准）。
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