大鼠谷胱甘肽还原酶(GR)elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标
特异性定量大鼠全血、肝脏/脑组织匀浆或细胞裂解液中的 谷胱甘肽还原酶(GR),一种依赖NADPH的黄素酶,通过催化氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原为还原型谷胱甘肽(GSH),维持细胞内氧化还原平衡,是抗氧化防御系统的核心组分。
产品名称 | 大鼠谷胱甘肽还原酶(GR)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1537 |
英文名称 | Rat GR ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
检测原理
双抗体夹心ELISA:
预包被抗大鼠GR抗体(靶向FAD结合结构域)捕获目标酶 → 生物素标记二抗结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统(450nm主波长/630nm参比波长读数)。
可选酶活性检测模块:通过监测NADPH在340nm的吸光度下降速率计算酶活性(单位:mU/mg蛋白)。
二、技术参数与验证

关键指标 技术说明
检测范围 0.5-50 ng/mL(蛋白浓度)或 0.1-10 U/mL(酶活性)
最低检测限 0.15 ng/mL(蛋白)或 0.03 U/mL(活性)
样本兼容性 全血(肝素抗凝)、肝组织线粒体提取物、红细胞裂解液
特异性验证 不与大鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)交叉
抗氧化干扰处理 试剂盒含DTT清除剂,避免样本中游离硫醇干扰
三、典型应用场景

氧化应激研究
酒精性肝病模型中GR活性下降与脂质过氧化(MDA水平)的负相关性分析
神经退行性疾病
帕金森病模型黑质区GR表达异常与多巴胺能神经元损伤的关系
毒理学评估
重金属(如镉)暴露后红细胞GR活性作为氧化损伤的生物标志物
四、操作关键要点

样本处理
全血样本:需用冷PBS(含1mM EDTA)1:5稀释后裂解红细胞(避免冻融)
线粒体提取物:建议使用蔗糖密度梯度离心法纯化,检测前加入0.1% Triton X-100释放膜结合酶
实验优化
酶活性检测需避光操作(NADPH光敏感性)
每板设置内参对照(如大鼠肝细胞质提取物)
五、注意事项

干扰排除
高胆红素样本(>10 mg/dL)需用活性炭吸附预处理
数据解读
建议联合检测GSH/GSSG比值及SOD活性以全面评估抗氧化状态
保存规范
未开封试剂盒4℃避光保存(有效期12个月),NADPH溶液需现配现用
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