产品介绍：
一、核心检测信息
检测目标
特异性定量大鼠全血、肝脏/脑组织匀浆或细胞裂解液中的 谷胱甘肽还原酶（GR），一种依赖NADPH的黄素酶，通过催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH），维持细胞内氧化还原平衡，是抗氧化防御系统的核心组分。
产品名称 | 大鼠谷胱甘肽还原酶(GR)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat GR ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A108051 |
检测原理
双抗体夹心ELISA：
预包被抗大鼠GR抗体（靶向FAD结合结构域）捕获目标酶 → 生物素标记二抗结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm主波长/630nm参比波长读数）。
可选酶活性检测模块：通过监测NADPH在340nm的吸光度下降速率计算酶活性（单位：mU/mg蛋白）。
二、技术参数与验证
关键指标 技术说明
检测范围 0.5-50 ng/mL（蛋白浓度）或 0.1-10 U/mL（酶活性）
最低检测限 0.15 ng/mL（蛋白）或 0.03 U/mL（活性）
样本兼容性 全血（肝素抗凝）、肝组织线粒体提取物、红细胞裂解液
特异性验证 不与大鼠硫氧还蛋白还原酶（TrxR）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）交叉
抗氧化干扰处理 试剂盒含DTT清除剂，避免样本中游离硫醇干扰
三、典型应用场景
氧化应激研究
酒精性肝病模型中GR活性下降与脂质过氧化（MDA水平）的负相关性分析
神经退行性疾病
帕金森病模型黑质区GR表达异常与多巴胺能神经元损伤的关系
毒理学评估
重金属（如镉）暴露后红细胞GR活性作为氧化损伤的生物标志物
四、操作关键要点
样本处理
全血样本：需用冷PBS（含1mM EDTA）1:5稀释后裂解红细胞（避免冻融）
线粒体提取物：建议使用蔗糖密度梯度离心法纯化，检测前加入0.1% Triton X-100释放膜结合酶
实验优化
酶活性检测需避光操作（NADPH光敏感性）
每板设置内参对照（如大鼠肝细胞质提取物）
五、注意事项
干扰排除
高胆红素样本（＞10 mg/dL）需用活性炭吸附预处理
数据解读
建议联合检测GSH/GSSG比值及SOD活性以全面评估抗氧化状态
保存规范
未开封试剂盒4℃避光保存（有效期12个月），NADPH溶液需现配现用
试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：
灵敏度高（抓得准）：
它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。
特异性强（瞄得准）：
基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。
操作简便且快速：
相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广：
它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定：
不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。
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