商品属性
产品名称 | 人促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human EPO ELISA Kit |
检测范围 | 7.8125mIU/ml-500mIU/ml | 货号 | PH32946 |
产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的促红细胞生成素（EPO）浓度。适用于科研用途，不可用于临床诊断。
检测原理
包被与捕获：微孔板预包被抗人EPO抗体，可特异性结合样本中的EPO。
酶标反应：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色测定：底物TMB在过氧化物酶催化下显蓝色，终止液（硫酸溶液）作用后转为黄色，450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与EPO浓度呈正相关。
试剂盒组成
标准品：冻干粉需用蒸馏水复溶至400mIU/mL，梯度稀释后使用。
酶标试剂：HRP标记的检测抗体（避光保存）。
浓缩洗涤液：20倍稀释后使用。
终止液：2M硫酸溶液。
其他：微孔板、封板膜、说明书等。
样本处理
血清：室温静置30分钟后，3000rpm离心10分钟，分离上清。
血浆：EDTA/肝素抗凝全血，3000rpm离心30分钟取上清。
细胞上清：直接3000rpm离心10分钟去除颗粒。
组织匀浆：PBS冲洗后匀浆，离心取上清。
注意：避免反复冻融，-20℃保存。
操作步骤
加样：
空白孔：加稀释液100μL。
标准孔/样本孔：分别加入标准品或样本100μL。
孵育：37℃温育2小时，洗板5次。
加酶标抗体：每孔加HRP标记抗体50μL，37℃孵育1小时，洗板5次。
显色：每孔加TMB底物90μL，避光反应15-30分钟。
终止：加终止液50μL，15分钟内测定OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本EPO浓度。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温，避免交叉污染。
终止液为强酸，需谨慎操作。
若样本浓度过高，需用稀释液调整至检测范围内。
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