商品属性
产品名称 | 人促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human EPO ELISA Kit |
检测范围 | 7.8125mIU/ml-500mIU/ml | 货号 | PH32946 |
产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的促红细胞生成素(EPO)浓度。适用于科研用途,不可用于临床诊断。
检测原理
包被与捕获:微孔板预包被抗人EPO抗体,可特异性结合样本中的EPO。
酶标反应:加入HRP标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色测定:底物TMB在过氧化物酶催化下显蓝色,终止液(硫酸溶液)作用后转为黄色,450nm波长下测定吸光度(OD值),OD值与EPO浓度呈正相关。


试剂盒组成
标准品:冻干粉需用蒸馏水复溶至400mIU/mL,梯度稀释后使用。
酶标试剂:HRP标记的检测抗体(避光保存)。
浓缩洗涤液:20倍稀释后使用。
终止液:2M硫酸溶液。
其他:微孔板、封板膜、说明书等。
样本处理
血清:室温静置30分钟后,3000rpm离心10分钟,分离上清。
血浆:EDTA/肝素抗凝全血,3000rpm离心30分钟取上清。
细胞上清:直接3000rpm离心10分钟去除颗粒。
组织匀浆:PBS冲洗后匀浆,离心取上清。
注意:避免反复冻融,-20℃保存。
操作步骤
加样:
空白孔:加稀释液100μL。
标准孔/样本孔:分别加入标准品或样本100μL。
孵育:37℃温育2小时,洗板5次。
加酶标抗体:每孔加HRP标记抗体50μL,37℃孵育1小时,洗板5次。
显色:每孔加TMB底物90μL,避光反应15-30分钟。
终止:加终止液50μL,15分钟内测定OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本EPO浓度。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温,避免交叉污染。
终止液为强酸,需谨慎操作。
若样本浓度过高,需用稀释液调整至检测范围内。
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关键字: 人促红细胞生成素;EPO;ELISA试剂盒;
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