预期用途
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清等生物样本中的硒蛋白P1（SEPP1）含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。
产品名称 | 小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse SEPP1 ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 | 1.56ng/mL-100ng/mL |
灵敏度 | 0.78ng/mL | 货号 | PM33094 |
实验原理
试剂盒以抗小鼠SEPP1抗体预包被微孔板，形成固相载体。实验时，样本中的SEPP1与包被抗体结合，依次加入生物素化检测抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。洗涤后加入显色底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液（酸性溶液）作用后转为黄色。通过450 nm波长测定吸光度（OD值），OD值与SEPP1浓度呈正相关，根据标准曲线计算样本浓度。
试剂盒组成
预包被酶标板：96孔（可拆卸条板）
SEPP1标准品：冻干粉2瓶，临用前以样本稀释液复溶至1 mL（浓度梯度需用户自行稀释，建议范围：15.6–1000 pg/mL）。
样本稀释液：1×10 mL
生物素化检测抗体：1×120 μL
HRP-亲和素工作液：1×120 μL
显色底物TMB：A液、B液各6 mL
终止液（1 M H₂SO₄）：1×6 mL
20×浓缩洗涤液：1×25 mL（使用前需蒸馏水稀释）
封板膜、说明书：各1份
需自备器材
酶标仪（450 nm滤光片）
移液器及一次性吸头
37℃恒温孵育箱
蒸馏水及离心管
操作步骤
复温与配液：试剂盒室温平衡30分钟，浓缩洗涤液按1:19稀释备用。
标准品稀释：复溶后梯度稀释至目标浓度（如1000 pg/mL起始，倍比稀释至15.6 pg/mL）。
加样：
标准品孔：50 μL/孔
样本孔：10 μL样本 + 40 μL稀释液（5倍稀释）
空白孔：仅加样本稀释液
孵育与洗涤：37℃孵育60分钟，洗板5次。
显色与终止：依次加入TMB底物（各100 μL/孔），避光反应15分钟，终止液50 μL/孔终止反应。
检测：450 nm波长读取OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。
注意事项
避免反复冻融标准品或样本。
显色时间需严格控制，避免过度反应。
若样本浓度超出检测范围，建议进一步稀释后复测。
储存条件
未开封试剂盒2–8℃保存，有效期12个月；开封后组分需按标签要求存放。
技术参数
检测范围：15.6–1000 pg/mL
灵敏度：<10 pg/mL
批内/批间变异系数：≤10%
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