产品介绍:

工作原理
试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术。预先包被抗小鼠硒蛋白P抗体的微孔板中加入标准品和样本,再加入生物素标记的抗硒蛋白P抗体,与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物。经过温育和洗涤后,加入显色底物TMB,产生颜色变化,最终在450nm波长下测定吸光度(OD值),样本中的硒蛋白P浓度与OD值成正比。
产品名称 | 小鼠硒蛋白P(SEPP1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse SEPP1 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A115523 |

性能参数

灵敏度:0.938ng/ml。
检测范围:1.563-100ng/ml。
特异性:可检测样本中的小鼠硒蛋白P,且与其他类似物无明显交叉反应。
重复性:板内和板间变异系数均小于10%。
试剂盒组成

预包被微孔板(96T/48T)。
HRP标记的检测抗体。
标准品。
样本稀释液。
洗涤缓冲液。
底物液和终止液。
封闭液。
样本处理

血清:全血标本室温放置2小时或4℃过夜,离心取上清。
血浆:用EDTA或肝素抗凝,离心取上清。
组织匀浆:用PBS冲洗组织,剪碎后研磨,离心取上清。
细胞培养物上清:离心去除颗粒和聚合物。
保存条件
试剂盒各组分应保存于2-8℃,避免反复冻融。
试剂与样本准备阶段:

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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