小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒
产品简介:
试剂盒基本原理
采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,通常利用夹心法进行检测。使用两个特异性抗体分别捕获和检测SEPP1,适用于更高灵敏度的检测。
英文名称 | Mouse SEPP1 ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A106173 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.78ng/mL | 检测范围 | 1.56ng/mL-100ng/mL |

试剂盒组成
预包被微孔板:固相载体,吸附捕获抗体。
标准品:已知浓度的SEPP1溶液(梯度稀释)。
酶标试剂:辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体。
底物A/B液:显色剂(如TMB)。
终止液:终止显色反应。
洗涤液:用于洗去未结合物质。
封板膜:防止孔间污染。
说明书:操作指南及数据解读。
操作步骤
样本处理:血清/血浆样本需离心分离,避免溶血或脂血;组织匀浆需匀浆后离心取上清,并按说明书比例稀释。
加样:加入标准品、样本及空白孔。
孵育:室温(通常1-2小时)孵育,使抗原-抗体充分结合。
洗涤:用洗涤液洗板3-5次,去除未结合物质。
加酶标试剂:加入酶标二抗(或检测抗体),二次孵育。
显色与终止:加入底物显色(10-15分钟),终止液终止反应。
读数:用酶标仪在450 nm波长测定OD值,绘制标准曲线计算浓度。
注意事项
样本要求:避免反复冻融,样本需新鲜或分装-80℃保存。
实验控制:设立空白对照、复孔及标准曲线,确保数据可靠性。
操作规范:严格避免交叉污染,加样时更换枪头。洗涤要彻底,避免背景偏高。
结果分析:标准曲线线性范围需覆盖样本浓度,超出范围需稀释或浓缩样本。
试剂盒性能
检测范围:通常为1.56-100ng/mL。
灵敏度:0.938ng/mL。
特异性:可检测重组或天然的SEPP1,不与其它细胞因子交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
适用范围
主要用于科研领域,不能用于临床诊断。
如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途:仅供科研实验使用,不可用于临床诊断。
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染,确保实验结果准确。
关键字: 小鼠硒蛋白P1 ;SEPP1;ELISA试剂盒;
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