1. 试剂盒基本信息
检测目标:人骨保护素(Osteoprotegerin, OPG/TNFRSF11B),一种可溶性肿瘤坏死因子受体超家族成员,参与骨代谢和免疫调节
检测方法:双抗体夹心酶联免疫吸附法(Sandwich ELISA)
样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、骨组织匀浆等
灵敏度:通常<15 pg/mL(不同品牌有差异)
检测范围:31.25-2000 pg/mL(部分试剂盒可扩展至15.6-4000 pg/mL)
特异性:仅检测天然或重组人OPG,不与RANKL或其他TNF受体家族成员交叉反应
产品名称
人OPG/TNFRSF11Belisa试剂盒
货号
XG-H1686
英文名称
Human OPG/TNFRSF11B ELISA Kit
规格
48T\96T
2. 试剂盒组成(96T)
组分 规格 储存条件
预包被抗OPG抗体微孔板 96孔 2-8℃
重组人OPG标准品 冻干粉(0、31.25、62.5、125、250、500、1000、2000 pg/mL) -20℃
生物素标记抗OPG检测抗体 120 μL -20℃
HRP标记链霉亲和素 120 μL -20℃
TMB显色液 10 mL 4℃(避光)
终止液(1M H?SO?) 10 mL 室温
洗涤缓冲液(20×) 50 mL 室温
样本稀释液 20 mL 2-8℃
封板膜 2张 室温
3. 检测原理
抗原捕获:样本中OPG与预包被抗体结合
信号放大:生物素标记二抗与OPG结合
酶催化显色:HRP-链霉亲和素催化TMB显色
定量分析:450nm测OD值,浓度与吸光度成正比
4. 操作流程
标准品复溶及梯度稀释
加样100μL/孔,37℃孵育2小时
洗涤5次
加检测抗体100μL/孔,37℃1小时
加酶结合物100μL/孔,37℃30分钟
TMB显色15分钟(避光)
终止反应,30分钟内检测
5. 数据分析
使用四参数logistic曲线拟合
复孔CV应<10%
超出范围样本需调整稀释比例复测
6. 应用领域
骨代谢疾病:骨质疏松、Paget's病、骨转移瘤研究
心血管疾病:血管钙化机制研究
免疫调节:类风湿性关节炎等自身免疫病
肿瘤研究:多发性骨髓瘤、乳腺癌骨转移
7. 关键注意事项
样本处理:
血清/血浆:避免溶血,4℃离心后分装
骨组织:充分匀浆后离心取上清
实验优化:
高浓度样本建议1:10-1:100稀释
每板必须包含标准曲线和质控
干扰因素:
避免反复冻融(≤3次)
脂血样本需超速离心
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