人OPG/TNFRSF11Belisa试剂盒

商品属性

规格：48人份或96人份（规格基于常见ELISA试剂盒设计，以“T”表示测试孔）

剂型：诊断试剂盒（酶联免疫吸附试验）

主要成分：预包被抗人OPG抗体（固相抗体）、HRP标记抗人OPG抗体（酶标抗体）、校准品、底物溶液（A和B）、洗涤缓冲液、终止液（2M硫酸）等。

保存条件与有效期：2–8℃避光保存，有效期为6个月（-20℃长期保存可延长至12个月）。开瓶后请立即使用，避免反复冻融。

关键参数

检测范围：0.5–500 pg/mL（ELISA常见宽范围检测，适用于生物样本）。

灵敏度：最低检测限≤1.0 pg/mL（可检测低浓度样本）。

特异性：与人OPG高度特异，与类似蛋白（如RANKL）无交叉反应。

重复性：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%（确保结果准确可靠）。

样本类型：适用血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、细胞培养液；避免使用溶血或脂血样本。

实验原理（双抗体夹心ELISA法）

本方法直接参考了ELISA通用原理：

步骤概要：将样本加入预包被抗人OPG抗体的微孔板中，OPG抗原与固相抗体结合。随后加入HRP标记的抗人OPG抗体（酶标抗体），形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。洗涤后去除未结合物，加入底物（A和B），在HRP催化下产生蓝色反应，终止液（硫酸）后转为黄色。

检测方式：使用酶标仪在450nm波长读取吸光度（OD值），OD值与OPG浓度成正比。校准品（标准曲线）用于定量计算样本浓度（基于四参数或线性回归拟合）。

实验步骤

准备工作：将所有试剂置于室温平衡30分钟。预稀释样本（如需要），制备校准品系列（建议0、25、50、100、250、500 pg/mL）。

加样与温育：

加入100μL校准品或样本至对应微孔，37℃温育1小时。

洗涤5次（使用洗涤缓冲液）。

加入酶标抗体：每孔加100μL HRP标记抗体，37℃温育1小时。洗涤同步骤。

显色与终止：每孔加100μL底物（A和B混合液），室温避光反应15分钟。加入50μL终止液，30分钟内读取OD450。

计算结果：使用校准曲线拟合软件，计算样本OPG浓度（公式：浓度 = a × OD + b）。

注意事项与质量保证

质量控制：每次实验需运行校准品和空白孔，板间变异应<15%。建议使用商业质控品验证。

干扰因素：避免样本反复冻融；溶血或高脂样本需离心后处理。

安全须知：试剂中含有硫酸，操作时佩戴手套和护目镜。废弃物按生物危害处理。

局限性：本试剂盒仅供研究使用，不用于临床诊断。未覆盖所有生理变异（如极端样本）。

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