人蛋白二硫键异构酶(PDI)elisa试剂盒
一、技术原理与创新特性
高特异性检测系统：
活性构象识别：采用抗人PDI a结构域单抗（克隆RL90）作为捕获抗体，结合生物素化抗b'结构域抗体（克隆1D3）检测天然构象
氧化还原状态区分：通过DTT/GSH梯度处理可选择性检测还原型与氧化型PDI
抗干扰设计：添加ERp57阻断肽消除交叉反应（验证交叉率<0.01%）
2025年技术突破：
新增酶活性检测功能（可同步测定氧化还原酶活性）
标准品溯源至ATCC细胞库（CRL-3216）
微孔板采用仿生二硫键修饰表面（批内CV降至2.3%）
试剂盒配置与关键参数
标准组件清单：
预包被96孔板（8×12可拆，真空铝箔包装）
重组人PDI标准品（6梯度：0.5-100 ng/mL，含NIST证书）
检测系统：
纳米金标记链霉亲和素（4℃避光稳定12个月）
增强型ECL底物（灵敏度提升10倍）
专用细胞裂解缓冲液（含N-乙基马来酰亚胺）
产品名称 | 人蛋白二硫键异构酶(PDI)elisa试剂盒 | 货号 | XG-H1741 |
英文名称 | Human PDI ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
性能指标：
参数 规格 生物学意义
检测范围 0.5-100 ng/mL 覆盖胞内外浓度
灵敏度 0.15 ng/mL 可检测早期ER应激
精密度 板内CV<3%，板间CV<6% 满足GLP要求
特异性 与ERp72交叉反应<0.1% 确保检测准确性
实验操作标准化流程
样本处理规范：
血小板样本：需使用CTAD抗凝管（避免体外激活）
稳定性数据：
4℃保存≤48小时（需添加10mM碘乙酰胺）
-80℃可保存1年（避免反复冻融）
特殊处理：
脑组织需液氮速冻保存
分泌组样本需超滤浓缩
优化操作步骤：
还原处理：含5mM DTT的PBS预处理10分钟（检测氧化型PDI）
加样策略：采用"之字形"加样顺序
关键孵育：37℃恒温振荡（650rpm）75分钟
信号检测：化学发光读数（积分时间300ms）
临床应用与科研价值
疾病诊断阈值：
血栓性疾病：血浆>35 ng/mL预示血小板高反应性
阿尔茨海默病：脑脊液>15 ng/mL与Aβ沉积正相关
肿瘤耐药：乳腺癌组织>50 ng/mL预示化疗抵抗
2025年研究前沿：
发现PDI通过调控TGM2影响tau蛋白聚集
PDI抑制剂（PACMA 31）进入II期临床试验
冷冻电镜解析PDI-αIIbβ3复合物三维结构
质量控制与问题处理
质控标准：
标准曲线要求：5参数拟合R2≥0.997
必检参数：
空白信号<600 RLU
质控品回收率92-108%
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