商品属性
产品名称 | 兔Cathepsin Delisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit Cathepsin D ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PR33725 |
产品概述
本试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物液体中Cathepsin D的含量。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。将抗兔Cathepsin D抗体包被于微孔板上，加入标准品或样品后，再加入生物素标记的抗兔Cathepsin D抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，最后加入TMB底物显色。颜色的深浅与样品中Cathepsin D的浓度成正比。
试剂盒组成
预包被微孔板：96孔（8孔×12条）
Cathepsin D标准品：6管（浓度分别为0、50、100、200、500、1000 pg/mL）
样品稀释液：1瓶（20mL）
生物素标记抗体：1瓶（120μL）
酶结合物：1瓶（120μL）
洗涤液（20×浓缩）：1瓶（30mL）
TMB显色液：1瓶（10mL）
终止液：1瓶（10mL）
封板膜：4张
说明书：1份
储存条件
未开封试剂盒应储存在2-8℃。开封后，微孔板应密封保存于2-8℃，其他组分按说明书要求保存。
样品收集与处理
血清：室温血液自然凝固10-20分钟，2000-3000rpm离心20分钟
血浆：使用EDTA或肝素抗凝，2000-3000rpm离心20分钟
细胞培养上清：2000-3000rpm离心20分钟
组织匀浆：按重量加入适量PBS，匀浆后3000rpm离心20分钟
操作步骤
准备：将试剂盒平衡至室温（20-25℃）
标准品稀释：按说明书梯度稀释
加样：每孔加入100μL标准品或样品
孵育：37℃孵育90分钟
洗涤：弃去液体，每孔加入洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次
加生物素标记抗体：每孔100μL，37℃孵育60分钟
洗涤：同步骤5
加酶结合物：每孔100μL，37℃孵育30分钟
洗涤：同步骤5
显色：每孔加入90μL TMB显色液，37℃避光显色15-30分钟
终止：每孔加入50μL终止液
检测：450nm波长下测定OD值
结果计算
绘制标准曲线
根据样品OD值计算Cathepsin D浓度
若样品稀释，需乘以稀释倍数
性能参数
检测范围：15.6-1000 pg/mL
最低检测限：7.8 pg/mL
批内变异系数：<10%
批间变异系数：<15%
回收率：85-115%
特异性：不与兔其他Cathepsin家族成员交叉反应
注意事项
不同批号试剂不可混用
避免反复冻融标准品和样品
严格按照说明书操作
TMB显色液避免接触金属器械
终止液为酸性溶液，避免接触皮肤和眼睛
应用领域
本试剂盒可用于心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等相关研究。
公司出售的产品
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关键字： 兔;Cathepsin D;elisa试剂盒;
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