小鼠Cathepsin Delisa试剂盒
产品简介:
检测方法
检测原理：采用夹心法酶联免疫吸附法，利用预包被的Cathepsin D多克隆抗体和生物素标记的检测抗体，结合酶标仪进行定量分析。
灵敏度与范围：灵敏度通常小于10 pg/ml，检测范围在312 pg/ml至20000 pg/ml之间。
英文名称 | Mouse Cathepsin D ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129853 | 规格 | 48T/96T |
样本类型
适用样本：包括小鼠的血清、血浆（肝素或EDTA抗凝）、细胞裂解液和细胞培养上清液。
产品组成
主要组分：预包被抗体的96孔板、重组标准品、生物素标记抗体、亲和素-过氧化物酶复合物、TMB显色液、终止液等。
应用领域
研究领域：用于研究Cathepsin D在溶酶体功能、细胞凋亡、肿瘤侵袭和转移等过程中的作用。
保存与有效期
保存条件：2-8℃保存6个月，-20℃可保存1年。
注意事项
样本处理：避免溶血样本，样本应避免反复冻融。
操作规范：严格按照说明书操作，使用前平衡至室温，避免交叉污染。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。
操作步骤
准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，制备标准品和样本。
加样：在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。
温育：37℃温育一定时间，使抗原抗体充分反应。
洗涤：洗去未结合的物质，避免干扰。
加酶标抗体：加入HRP标记的链霉亲和素，再次温育。
再次洗涤：洗去多余的酶标抗体。
注意事项
严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。
试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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