转基因玉米品系DBT418检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
简介:
产品名称 | 转基因玉米品系DBT418检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P668 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

一、DBT418品系背景与检测必要性:
品系特性
抗虫/耐除草剂:携带 Cry1Ac基因(抗鳞翅目害虫)和 pat基因(耐草铵膦除草剂),由中国农业科学院研发。
应用现状:主要在中国试验性种植,未获欧盟、美国商业化批准,需严格监管。
法规要求
中国标准:依据《农业转基因生物安全管理条例》,需标识转基因成分。
出口限制:出口至欧盟、日韩等需提供“未检出DBT418”证明(检测限≤0.1%)。
二、试剂盒核心技术设计:
靶标基因选择
主靶标:
Cry1Ac基因(杀虫蛋白基因)
品系特异性序列:DBT418的 35S-CTP融合启动子 或 T-DNA边界序列(区别于MON810、Bt176等)。
内参基因:玉米 zSSIIb(淀粉合成酶基因),确保DNA提取有效性。
荧光探针方案
双通道检测:
FAM通道:Cry1Ac或品系特异性序列。
HEX通道:zSSIIb内参基因。
灵敏度:最低检出限 10拷贝/μL(约0.05%转基因成分)。
三、检测流程与质控要点:
步骤 关键操作
1. 样本前处理 玉米籽粒需液氮研磨;加工食品(如膨化玉米)采用 磁珠法提取DNA 以提高得率。
2. PCR反应体系 含 UNG酶防污染系统;阳性对照(DBT418标准质粒)需梯度稀释验证线性。
3. 扩增程序 95℃ 3min → (95℃ 15s → 60℃ 45s)×45循环,FAM/HEX双通道采集信号。
4. 结果判读 阳性标准:Ct值≤36且扩增曲线呈典型S型;内参基因Ct≤32。
四、常见问题与解决方案:
假阳性风险
原因:交叉污染或非特异性扩增(如与Bt棉花Cry1Ac基因交叉)。
对策:熔解曲线分析 + 测序验证扩增片段。
假阴性风险
原因:深加工样本DNA降解或PCR抑制剂干扰。
对策:添加 BSA(牛血清白蛋白) 或稀释模板DNA。
法规更新提示
2025年中国农业农村部拟将DBT418纳入 强制标识目录,建议企业提前布局检测能力。
公司正在出售的产品:
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磷酸化细胞核因子重组兔单克隆抗体 | 真菌/酵母尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP glucose pyrophosphorylase)活性比色法定量检测试剂盒 |
环指蛋白191抗体 | N-乙酰转移酶8抗体 |
五、应用场景与扩展建议:
种子认证:确保亲本种子未混杂DBT418成分。
进口清关:针对南美进口玉米检测潜在非法混杂。
科研合规:转基因生物安全评价中的品系溯源。
关键字: 转基因玉米品系DBT418;检测试剂盒;荧光PCR法;
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