商品属性:

产品名称 | 转基因玉米品系Bt11检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P672 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

试剂盒组成

核心组分
引物探针混合液:针对Bt11外源基因(如PAT)和玉米内源基因(如ZSSIIb)设计的特异性引物及荧光探针。
PCR反应液:含dNTPs、Taq DNA聚合酶、缓冲液等扩增必需成分。
阳性对照:含Bt11基因的DNA片段,用于验证实验有效性。
阴性对照:无模板对照(NTC),用于排除污染。
辅助试剂与耗材
DNA提取试剂(如裂解液、磁珠等),部分试剂盒需自备核酸提取仪。
三、检测原理

靶标基因选择
外源基因:Bt11品系特有的PAT基因(草丁膦抗性基因)或其连接区序列。
内源基因:玉米内参基因(如ZSSIIb),用于确认样本DNA质量。
荧光探针机制
探针5'端标记荧光报告基团(如FAM),3'端标记淬灭基团(如BHQ1)。PCR扩增时,Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针,释放荧光信号,通过Ct值定量分析靶标DNA含量。
四、操作流程

样本处理与DNA提取
玉米样本需研磨破碎,采用试剂盒提供的裂解液(含盐酸胍、SDS等)快速裂解细胞,结合磁珠纯化DNA。
阴性/阳性对照直接使用试剂盒提供的标准品。
PCR扩增
反应体系:20-25μL体系,含反应液、引物探针、模板DNA及酶。
扩增程序:
预变性:95℃ 2分钟;
循环扩增:95℃ 15秒,60℃ 30秒(40循环);
熔解曲线分析(可选)。
结果判读
定性检测:Ct值≤35为阳性,≥40为阴性;若35<Ct<40需重复实验。
定量检测:根据标准曲线(如102-10?拷贝/μL梯度稀释)计算样本DNA浓度。
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五、技术特点

高特异性
引物探针针对Bt11基因保守区设计,避免与其他转基因品系(如GA21、NK603)交叉反应。
灵敏度高
最低检测限可达10拷贝/μL,可识别0.1%以上的转基因成分。
快速高效
全程仅需2小时(传统酚氯仿法需2天),支持闭管操作减少污染风险。
兼容性强
适用于多种样本类型(叶片、种子、加工产品)及自动化设备。
六、应用领域

科研实验:转基因玉米品系鉴定、转基因污染监测。
质量控制:进出口检验、加工食品成分筛查。
现场检测:结合微流控芯片技术,可实现“样本进-结果出”的便携式检测。
关键字: 转基因玉米品系Bt11;检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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