商品属性：
产品名称 | 转基因玉米品系5307检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P674 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，利用品系特异性的引物和荧光探针，对玉米及其加工产品中的转基因玉米品系5307的特定基因序列进行扩增和检测。该方法具有高特异性、高灵敏度和高准确性的特点，是国内外转基因产品标识和安全管理的主流检测技术。
二、 检测原理
DNA提取：首先从待测的玉米样品（如种子、叶片、粉末、饲料、加工食品等）中提取纯化基因组DNA。
实时荧光PCR扩增：
特异性引物：试剂盒中包含针对玉米内标准基因和转基因玉米5307品系特异性边界序列设计的两对引物。
内标基因：通常选择玉米本身的基因（如Zein基因、IVR基因等），用于验证DNA提取质量合格且PCR反应体系正常。如果内标基因无信号，则说明实验失败，结果无效。
5307品系特异性基因：精准定位在转基因插入的边界序列上，确保只对5307品系产生信号，而不会与其他玉米品系或转基因品系发生交叉反应。
荧光探针：与引物对配套的是一条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。当探针完整时，其报告基团的荧光被淬灭基团抑制。在PCR扩增过程中，Taq酶会水解与模板结合的探针，使报告基团游离出来并产生荧光信号。
信号检测与结果判定：
实时荧光PCR仪在每一个循环结束后，会检测各反应管中的荧光信号强度。
当样品中含有5307品系成分时，其对应的荧光通道信号会随着扩增循环数的增加而累积，并超过设定的阈值，仪器会记录下一个Ct值。
结果判定：
内标基因Ct值正常，5307通道无Ct值或Ct值≥40：结果为阴性，表示未检测到转基因玉米5307成分。
内标基因Ct值正常，5307通道Ct值＜40且呈典型的S型扩增曲线：结果为阳性，表示检测到转基因玉米5307成分。
内标基因无Ct值或Ct值异常：结果为无效，需重新检测。
三、 主要组成部分
一个典型的试剂盒通常包含以下组分：
PCR反应液：含有优化的缓冲体系、dNTPs、Mg2?等。
Taq DNA聚合酶：热启动酶，提高反应特异性和灵敏度。
引物和探针预混液：已按比例混合好的针对内标基因和5307品系特异性基因的引物及荧光探针。
阳性对照：含有转基因玉米5307目标序列的DNA模板，用于验证整个检测流程的有效性。
阴性对照：不含转基因成分的玉米DNA或超纯水，用于监控实验过程中是否存在污染。
DNase/RNase-Free水。
四、 技术特点与优势
高特异性：针对品系特异性序列设计，能准确区分5307与其他转基因或非转基因玉米品系。
高灵敏度：可检测到极低含量的转基因成分，检测下限通常可达到0.1%甚至更低，满足法规对标识阈值的要求。
定量能力：通过与已知浓度的标准品同时进行PCR，可以对样品中5307的成分含量进行相对或绝对定量。
防污染设计：采用闭管检测，PCR结束后无需开盖进行电泳，大大降低了扩增产物污染的风险。
快速高效：整个PCR过程通常在1.5-2小时内完成，结合自动化核酸提取系统，可在一天内出具报告。
标准化与自动化：操作流程标准化，易于在实验室中推广，并可实现高通量检测。
五、 主要应用领域
进出口检验检疫：确保进口玉米及其产品符合目的国的转基因安全管理法规。
农业市场监管：对市售的玉米种子、粮食及初加工产品进行监督抽查。
食品标签符合性验证：检测预包装食品是否如其标签所声称的“非转基因”或含有转基因成分。
科研与育种：在分子育种和生物技术研究中，用于对后代材料进行快速、准确的基因型鉴定。
供应链管理：为非转基因产品产业链（如有机食品、非转基因标识产品）提供溯源和身份保持验证。
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六、 注意事项
实验室分区：必须严格遵守分子生物学实验室的分区原则（试剂准备区、样品制备区、扩增及产物分析区），以防止污染。
质量控制：每次实验都必须设置阳性和阴性对照，以确保结果的可靠性。
操作人员：需经过专业培训，熟悉实时荧光PCR原理和操作规范。
样品代表性：取样需科学，确保待测样品能代表整批货物。
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