商品属性:

产品名称 | 转基因玉米Bt10检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P676 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

一、 核心概述

转基因玉米Bt10检测试剂盒(PCR-荧光探针法)是一种基于实时荧光定量PCR技术的体外诊断试剂盒。它专门用于快速、特异、灵敏地检测玉米及其加工产品中是否含有转基因成分Bt10。
其工作原理是通过特异性引物和荧光探针,对样品中可能存在的Bt10玉米特有的DNA序列进行扩增和检测,从而实现定性或定量分析。
二、 检测对象:Bt10玉米是什么?

Bt10玉米是美国公司开发的一种转基因抗虫玉米。
它含有来自苏云金芽孢杆菌的 cry1Ab 基因,该基因能表达一种对鳞翅目害虫(如欧洲玉米螟)具有毒性的蛋白质,从而使玉米具有抗虫性。
Bt10玉米并未获得商业化种植的批准,但由于其在研发阶段的意外混入和流通,它成为一种需要重点监控的非法或未批准的转基因品系。因此,对进口玉米及其产品进行Bt10检测,是各国(尤其是中国、欧盟等)食品安全和口岸检验检疫的重要环节。
三、 检测原理(PCR-荧光探针法)

这种方法,通常也称为 TaqMan探针法,是实时荧光定量PCR的一种。其过程如下:
DNA提取:首先从玉米样品(如玉米粒、玉米粉、玉米片等)中提取纯化基因组DNA。
PCR扩增:将提取的DNA加入反应体系,该体系包含:
特异性引物:一对设计精良的短DNA片段,能专一性地与Bt10玉米特有的DNA靶序列的两端结合。
荧光探针:一条较短的寡核苷酸探针,其两端分别标记有报告荧光基团 和淬灭荧光基团。当两者距离很近时,报告基团的荧光会被淬灭基团吸收,仪器检测不到荧光信号。
荧光信号产生:在PCR扩增的退火/延伸阶段,引物和探针会与目标DNA链结合。当PCR酶进行链的合成时,其5‘→3’外切酶活性会降解与模板结合的探针,使报告基团与淬灭基团分离。
一旦分离,报告基团就会发出荧光。
信号检测与结果判定:
实时荧光定量PCR仪会在每一个PCR循环结束后,检测反应管中的荧光强度。
每扩增一条DNA链,就有一个探针被水解,释放一个荧光信号。因此,荧光信号的强度与PCR产物的数量成正比。
通过监测荧光信号随时间(循环数)的变化,可以绘制出扩增曲线。
阳性结果:如果样品中含有Bt10成分,则会观察到荧光信号超过设定阈值的典型“S”形扩增曲线。
阴性结果:如果样品中不含有Bt10成分,则引物和探针无法结合,没有特异性扩增,荧光信号不会增强,曲线呈平直状态。
四、 试剂盒的典型组成

一个完整的试剂盒通常包含以下组件:
阳性对照:含有已知浓度的Bt10玉米DNA片段,用于验证实验是否成功。
阴性对照:不含Bt10成分的玉米DNA或纯水,用于排除污染和假阳性。
PCR反应液:含有缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
Taq DNA聚合酶:具有5‘→3’外切酶活性的热稳定酶。
引物和探针混合液:针对Bt10特异性序列设计。
使用说明书
公司正在出售的产品:

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五、 技术特点与优势

高特异性:通过精心设计的引物和探针,只对Bt10的特有序列进行扩增,能有效避免与其他转基因品系(如Bt11、Bt176)或非转基因玉米的交叉反应。
高灵敏度:可以检测到极微量的转基因成分,检测下限通常可低至0.01%甚至更低(即每10000个玉米细胞中含有1个Bt10细胞)。
快速高效:整个PCR过程可在1.5-2小时内完成,实现了高通量、快速筛查。
闭管操作,防污染:扩增和检测在同一密闭管中进行,无需后续电泳,大大降低了交叉污染的风险。
定量能力:通过与标准品曲线对比,该技术不仅能进行定性检测(有/无),还能准确定量样品中Bt10成分的含量,满足标识法规的要求。
六、 主要应用场景

口岸检验检疫:对进口玉米、玉米粕、玉米油等农产品进行强制性安全筛查。
食品安全监管:市场监管部门对市售玉米类食品(如零食、饲料)进行抽检。
企业原料控制:食品加工和饲料生产企业对采购的玉米原料进行入厂检验,确保合规。
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