商品属性:

产品名称 | 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪冠状病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/Pdcov/PRV-A)检测试剂盒(四重荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P780 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

核心概述

检测病原体详解说明
这四种病毒引起的临床症状高度相似(水样腹泻、呕吐、脱水),但致病力和流行特点有所差异,混合感染常见且会加剧病情。快速、准确的鉴别诊断对于制定有效的防控措施至关重要。
TGEV & PEDV:是历史上造成仔猪死亡率最高的两种冠状病毒,症状极为相似。
PDCoV:较新发现的冠状病毒,同样引起严重腹泻,常与PEDV混合感染。
PRV-A:轮状病毒是导致仔猪、断奶猪腹泻的常见病原,发病率高,但死亡率通常低于PEDV和TGEV。
检测原理(四重荧光PCR法)

其核心技术在于多重引物探针系统和多通道荧光检测。
多重引物与探针:
试剂盒中含有四套特异性引物,分别针对TGEV、PEDV、PDCoV和PRV-A的独特保守基因区域(如编码核衣壳蛋白N或纤突蛋白S的基因)。
同时含有四条对应的特异性探针,每条探针都标记有不同发光颜色的荧光报告基团(例如:FAM用于PEDV,VIC/HEX用于TGEV,CY5用于PDCoV,ROX/Texas Red用于PRV-A)。
一体化反应与检测:
在同一个PCR反应管中,包含所有四种病原体的引物、探针以及PCR所需的其他组分。
经过逆转录和PCR扩增后,如果样本中含有某种病毒,其对应的探针就会被切割,释放出特定颜色的荧光信号。
荧光PCR仪配备多个光学检测通道,能够同步、独立地监测和识别四种不同的荧光信号。
结果判定:
仪器软件会根据不同通道的荧光增长曲线(S型曲线)和Ct值,分别判断四种病原体是阳性还是阴性。
四、 试剂盒主要组成

PCR反应液:包含缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
TGEV/PEDV/PDCoV/PRV-A四重引物探针混合液(核心组分)。
阳性对照:通常含有四种病原体目标基因片段的混合质粒,用于验证检测有效性。
阴性对照:无核酸酶水。
内标(可选):用于监控从核酸提取到PCR扩增的全过程,防止假阴性。
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五、 操作流程

样本采集:采集腹泻猪的粪便、肠道内容物或肛拭子。
核酸提取:从样本中提取总RNA。
配制反应体系:将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物和四重引物探针混合液按比例混合于单一反应管中。
上机检测:将反应管放入荧光PCR仪,运行设定的扩增程序。
结果分析:软件自动分析各通道的扩增曲线,并生成针对每种病原体的单独结果报告。
六、 产品特点与优势

高通量与高效率:一管四检,将原本需要四个独立实验才能完成的工作合并为一次,极大地节省了时间、人力和试剂成本。
卓越的鉴别诊断能力:能够清晰区分四种临床症状相似的腹泻病原,为精准用药和防控提供直接依据。
高灵敏度与特异性:各通道引物探针经过严格验证,避免交叉反应,确保每种病原体检测的准确性。
节省珍贵样本:对于微量或难得的样本,只需一份核酸提取物即可完成全部四种病原的筛查。
快速全面:在2-3小时内即可获得一份全面的病原谱报告,有利于快速决策。
关键字: 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪冠状;检测试剂盒;四重荧光PCR法;
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