猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)检测试剂盒(三重荧光PCR法) 新品

商品属性：

产品概述

本产品是一种用于同时检测并鉴别猪只样本（如粪便、肠道内容物）中三种主要腹泻病原体——猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪A组轮状病毒的分子诊断试剂盒。

其核心技术是三重荧光PCR，在一次PCR反应中，使用三组不同的特异性引物和荧光标记探针（每种探针标记有可区分的荧光基团），同时对三种病毒的核酸进行扩增和实时检测。这极大地提高了诊断效率，尤其适用于临床上症状相似、难以区分的猪病毒性腹泻。

二、 检测原理

核酸提取：从样本中提取总RNA（这三种病毒均为RNA病毒）。

逆转录：将RNA逆转录为cDNA。

三重荧光PCR扩增与检测：

在同一个PCR反应管内，包含三套分别针对TGEV、PEDV和PRV-A特异性基因序列设计的引物和探针。

每一条探针都标记有一种独特的报告荧光基团（例如，FAM用于TGEV，VIC/HEX用于PEDV，CY5/ROX用于PRV-A）以及一个淬灭基团。

在PCR循环过程中，当探针与目标序列结合并被Taq酶水解后，相应的报告荧光基团会释放出特定波长的荧光信号。

实时荧光PCR仪配备多个光学检测通道，能够同步、独立地检测并区分这三种不同的荧光信号。

结果判读：

仪器软件会根据不同通道的荧光信号增长曲线和Ct值，分别对三种病毒进行判读。

例如：仅FAM通道有扩增→ TGEV阳性；FAM和VIC通道同时有扩增→ TGEV和PEDV混合感染；三个通道均有扩增→ 三重混合感染。

三、 试剂盒组成

与单重试剂盒类似，但核心成分是“三合一”的：

三重PCR反应液：已优化混合了针对TGEV、PEDV、PRV-A的三组引物和探针。

逆转录酶混合物

热启动Taq DNA聚合酶

阳性对照：通常包含TGEV、PEDV和PRV-A的三重阳性质控品。

阴性对照：无核酸酶水。

四、 技术特点与优势

除了继承单重荧光PCR的高灵敏度、高特异性、快速等优点外，三联试剂盒还具有以下突出优势：

高效省时：“一管三检”，一次反应即可完成三种病原的鉴别诊断，将原本需要三次独立实验的工作合并为一次，节省了大量时间、人力和试剂成本。

鉴别诊断能力强：能清晰区分TGEV、PEDV和PRV-A的单一感染或混合感染，为临床用药和防控提供精准指导。这在混合感染常见的猪场中至关重要。

样本节省：对于珍贵或微量样本，只需提取一份核酸即可进行多种病原检测，避免了样本不够用的问题。

一致性高：所有目标病原在同一反应体系中扩增，减少了因操作和反应条件差异导致的误差，结果更可靠。

高通量：特别适合进行大规模的流行病学调查和群体健康监测。

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五、 应用场景

猪病毒性腹泻的快速鉴别诊断：当猪群（尤其是仔猪）爆发急性、水样腹泻时，快速确定主要病原是PEDV、TGEV还是PRV-A，或是混合感染。

混合感染调查：精准评估猪场中多种腹泻病毒共感染的普遍性和严重程度。

引种监测与隔离检疫：对新引进的种猪进行全面的腹泻病毒筛查，防止引入多种病原。

疫苗免疫效果评估：在免疫后监测特定病毒（如PEDV）的带毒或排毒情况，同时排除其他病毒的干扰。

流行病学研究：用于了解本地区TGEV、PEDV、PRV-A的流行分布和演变规律。

六、 局限性

技术要求更高：对试剂盒的工艺要求极高，必须确保三组引物探针之间没有相互干扰，否则会影响灵敏度和特异性。

交叉反应风险：需要在设计阶段进行严格验证，确保与猪德尔塔冠状病毒等其他猪肠道病原体无交叉反应。

设备要求：需要配备具有至少三个荧光通道的实时荧光PCR仪。

成本：虽然单次检测成本低于三次单重检测，但试剂盒本身的单价通常高于单重试剂盒。