产品介绍:

实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被伪狂犬病毒gD抗原的微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PRV-gDAb呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
产品名称 | 小鼠抗伪狂犬病毒gD抗体(PRV-gDAb)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse PRV-gDAb ELISA |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117875 |
产品性能

检测范围:通常为0-24 ng/mL。
灵敏度:可检测低浓度的PRV-gDAb。
特异性:不与其他结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。

试剂盒组成

酶标包被板:预先包被捕获抗原的微孔板。
标准品:不同浓度梯度的标准品溶液。
酶标试剂:HRP标记的检测抗体。
样本稀释液:用于稀释待测样本。
洗涤液:用于洗涤微孔板。
显色底物:A液和B液,用于显色反应。
终止液:终止显色反应。
操作步骤

准备试剂盒:取出所需板条,剩余部分密封保存于2-8℃。
加样:加入标准品和待测样本,37℃孵育。
洗涤:弃去液体,洗板。
加抗体:加入生物素化抗体,孵育后洗涤。
加酶结合物:加入酶结合物,孵育后洗涤。
显色:加入底物溶液,避光孵育,显色后加入终止液。
测定:酶标仪测定OD值,计算样本浓度。
注意事项
保存条件:未开封试剂盒保存于2-8℃,有效期6-12个月。
操作规范:严格按说明书操作,避免交叉污染,使用前恢复试剂至室温。
安全防护:操作时戴手套、穿工作衣,避免接触皮肤和衣物,废弃物按传染物处理。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液、组织等。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 小鼠抗伪狂犬病毒gD抗体 ;PRV-gD;ELISA试剂盒;
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