产品介绍:

产品原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),通过捕获抗体包被微孔板,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经温育和洗涤后,利用底物显色,颜色深浅与抗体浓度呈正相关。
产品名称 | 小鼠抗猪伪狂犬病毒gD抗体(PRV-gDAb)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse PRV-gDAb ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117847 |
产品组成

酶标包被板:预先包被捕获抗体的微孔板。
标准品:不同浓度梯度的标准品溶液。
酶标试剂:HRP标记的检测抗体。
样本稀释液:用于稀释待测样本。
洗涤液:用于洗涤微孔板。
显色底物:A液和B液,用于显色反应。
终止液:终止显色反应。

产品性能

检测范围:0 - 24 ng/mL。
灵敏度:低检测浓度小于10 ng/mL。
特异性:不与其他结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。
线性回归:样品线性回归相关系数R值为0.95以上。
操作步骤

加样:设置标准品孔和样本孔,加入不同浓度的标准品和待测样本。
加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
温育:封板后37℃温育60分钟。
洗涤:弃去液体,拍干,重复洗涤5次。
显色:加入显色剂A和B,避光显色15分钟。
终止:加入终止液,终止反应。
测定:酶标仪450nm波长下测量OD值。
注意事项

样本处理:血清、血浆等样本需按规范处理,避免溶血和反复冻融。
操作规范:严格按说明书操作,避免交叉污染,确保结果准确。
试剂保存:试剂盒各组分需在2-8℃保存,避免光照和高温。
适用范围
适用于血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等多种样本类型,可用于科研和临床检测。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 小鼠;PRV-gDAb;ELISA试剂盒;
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