产品介绍:
禽流感病毒N3亚型(AIV-N3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测禽类样本中AIV-N3亚型病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,利用特异性引物和探针,针对病毒的保守基因序列进行扩增和检测。
产品名称 | 禽流感病毒N3亚型(AIV-N3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3645 |
1. 检测原理
该试剂盒主要采用实时荧光定量RT-PCR技术(qRT-PCR),通常基于TaqMan探针法。
靶标基因: 针对AIV-N3亚型病毒基因组中编码神经氨酸酶(N)的基因保守序列,设计特异性的引物和探针。
反应机制: 反应体系中包含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs、引物、探针等。首先将样本中的病毒RNA逆转录为cDNA,随后进行PCR扩增。若样本中存在N3亚型病毒核酸,FAM荧光标记的特异性探针会被Taq酶水解,释放荧光信号,仪器通过监测荧光信号的扩增曲线(Ct值)来判断样本中是否含有该病毒。
多重检测: 部分试剂盒采用双重或多重荧光PCR技术,可同时检测N3亚型和其他亚型(如H5、H7等),提高检测效率。
2. 产品特点
高特异性: 引物和探针针对N3亚型设计,与其他亚型(如H7、N9)及常见呼吸道病毒无交叉反应,确保检测结果的准确性。
高灵敏度: 灵敏度极高,最低检测限可低至 1000 copies/mL(部分产品甚至更低),能够检测到极低浓度的病毒,有助于早期感染的发现。
快速高效: 整个检测过程(包括核酸提取和PCR扩增)通常在 2-3小时 内完成,远快于传统的病毒分离培养法。
操作简便: 市售试剂盒通常提供预混好的PCR Mix,操作简便,减少了配液误差和污染风险。
3. 主要用途
临床辅助诊断: 用于检测疑似感染禽类的组织样本(如肺、脾、肾)、排泄物(如粪便)、分泌物(如咽喉拭子、泄殖腔拭子)等,辅助进行早期确诊。
流行病学监测: 用于养殖场、活禽市场、野生鸟类栖息地等场所的定期监测,了解N3亚型禽流感病毒的流行情况和变异趋势。
科研应用: 用于禽流感病毒的分子流行病学研究、病毒基因组变异分析等。
4. 储存与使用注意事项
储存条件: 试剂盒组分(特别是酶混合液)通常需要 -20℃ 避光保存,避免反复冻融,有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测组织样本、排泄物、分泌物等。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染。
结果判读(参考值):
阳性: FAM通道扩增曲线呈典型“S”型,且Ct值 ≤ 35-40(不同厂家设定阈值不同,通常为35或40)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
无效: 阳性对照未扩增或内标(如有)未扩增,提示实验失败,需重做。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
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关键字: 禽流感病毒N3亚型 ;AIV-N3 ;检测试剂盒;荧光PCR法;
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