天麻探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用探针法特异性检测天麻（Rhizoma gastrodiae）核酸序列，适用于科研领域的天麻物种鉴定。试剂盒包含优化的引物、探针、反应缓冲液及阳性对照，支持定性和定量分析，灵敏度高，特异性强，可有效避免与其他微生物的交叉反应。

产品组成

核心成分

探针法qPCR缓冲液：500 μL

qPCR酶混合液：50–100 μL

荧光PCR模板稀释液：1 mL

引物-探针干粉/混合液：50次反应

阳性对照（10^7–10^8 拷贝/μL）：50 μL

阴性对照：40 μL

储存条件

运输：低温冰袋（2–8℃）

保存：-20℃避光，有效期12个月，避免反复冻融。

实验流程

1. 标准曲线制备（定量分析适用）

按10倍梯度稀释阳性对照（10^1–10^6 拷贝/μL），独立操作避免污染。

标记离心管（6–1号），依次加入稀释液和模板，涡旋混匀后冰上暂存。

2. 样品DNA提取

建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。

兼容多数商业DNA提取试剂盒，提取后模板需纯度达标（A260/A280≈1.8–2.0）。

3. qPCR反应体系（20 μL/管）

| 成分 | 体积（μL） |

| qPCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 引物-探针 | 1–2 |

| 模板DNA | 5 |

| 超纯水（补足） | 至20 |

4. 扩增程序

逆转录（若适用）：50℃ 10–30 min

预变性：95℃ 10 min

循环扩增（40 cycles）：

95℃ 15 sec（变性）

60℃ 30–60 sec（退火/延伸，采集FAM通道信号）

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。

定性检测：

阳性：Ct≤35–39，扩增曲线呈指数增长。

阴性：Ct≥40或无信号。

灰区值（35–40）：需重复检测确认。

注意事项

防污染措施

分区分操作（样品处理、试剂配制、扩增）。

使用带滤芯枪头及专用工作服。

质量控制

阴性对照应无扩增（Ct≥40），阳性对照Ct≤30。

局限性

结果受样本质量、提取效率及操作规范影响。

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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