莱菔子探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 莱菔子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Raphani Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5060 |
产品用途
专用于莱菔子（Semen raphani）的定性或定量PCR检测，仅限科研使用。
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，无需额外配制反应体系。
高灵敏度与特异性：优化设计的引物和探针针对莱菔子高度保守区，避免与其他微生物DNA交叉反应。
内置对照：提供无传染性阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于区分假阴性结果。
兼容性强：适用于多数商业化DNA提取试剂盒，支持20μL或40μL反应体系。
稳定性：-20℃保存12个月，低温运输确保试剂活性。
规格与成分
| 成分 | 规格 |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL（本色管） |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） |
| 莱菔子PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 莱菔子qPCR探针 | 50 μL（棕色盖） |
| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL）| 50 μL（红盖） |
| 使用手册 | 1份 |
使用方法
1. 标准曲线制备（以10倍梯度稀释为例）
标记6管（7至2号），每管加45 μL稀释液。
依次将阳性对照稀释至10^7–10^2拷贝/μL，冰上保存备用。
2. 样品DNA制备
建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），使用兼容的DNA提取方法。
3. qPCR反应（20μL体系）
| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
| 莱菔子探针 | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| DNA模板/标准品/水 | 7 μL | 7 μL水 | 7 μL标准品 |
反应程序：
预变性：95℃ 3分钟；
40循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）。
数据分析
定量检测：以Ct值与标准曲线计算样品浓度。
定性检测：
阳性：Ct ≤ 35或 ≤ 36，且扩增曲线典型；
阴性：Ct ≥ 40；
可疑结果（35–40）：需重复检测。
注意事项
分区操作：样品处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免交叉污染。
防污染措施：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。
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