预期用途

用于太子参核酸的体外定性检测,适用于科研分析,不适用于临床诊断。
产品名称 | 太子参探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Pseudostellariae Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4968 |

检验原理

采用实时荧光定量PCR技术(TaqMan探针法),针对太子参基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记荧光报告基团,3'端标记淬灭基团,PCR扩增时Taq酶切割探针释放荧光信号,通过荧光强度变化实现靶序列的定性与定量分析。
试剂组成

扩增预混液:含dNTPs、缓冲液、Mg²⁺等。
引物探针混合液:太子参特异性引物及FAM标记探针。
阳性对照:人工合成太子参靶序列标准品(1×10⁸拷贝/μL)。
阴性对照:无核酸酶水。
使用说明书:1份。
注意:不同批号组分不可混用,避免反复冻融(建议分装保存)。
储存及有效期
储存条件:-20℃避光保存,运输需低温(2~8℃)。
有效期:12个月(未开封)。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等),需配置FAM通道。
操作步骤

1. 样本处理
DNA提取:推荐使用柱式提取试剂盒,避免RNA降解(若检测RNA需先反转录)。
质量控制:建议同时设置阳性/阴性对照及提取空白对照。
2. 反应体系配制(20μL体系)
| 组分 | 体积(μL) |
| 预混液 | 10 |
| 引物探针混合液 | 2 |
| 模板DNA | 5 |
| 无核酸酶水 | 3 |
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | 40 |
| 信号采集 | 60℃ | 实时采集 | 40 |
结果判读
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈典型S型。
可疑:35<Ct值<40,需重复检测。
阴性:Ct值≥40或无扩增曲线。
注意:阴性对照应无扩增,阳性对照Ct值需≤30。
注意事项

实验分区操作(试剂配制、样本处理、扩增区),避免交叉污染。
探针避光保存,避免反复冻融(建议分装)。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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