荆芥探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 荆芥探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Herba Schizonepetae Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5070 |
产品特点
高特异性：引物与探针针对荆芥保守序列设计，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限达10~100拷贝/μL（或10ng基因组DNA）。
操作简便：预混试剂即开即用，支持快速上样电泳（含上样染料）。
防污染设计：提供阳性对照（无传染性DNA片段）及阴性对照。
多重检测兼容：适配双重或三重PCR体系，支持高通量分析。
技术原理
采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术：
探针法：5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。Taq酶切割探针后释放荧光信号，通过荧光强度变化定量靶序列。
扩增产物：预期片段长度560bp或其他特异性片段。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 |
| qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 酶混合液 | 100μL |
| 引物混合液 | 100μL |
| 荧光探针 | 50μL |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL |
| 模板稀释液 | 1mL |
操作步骤
标准曲线制备：将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL）。
RNA提取：自备样品RNA，建议使用柱式提取试剂盒。
反应体系配置（20μL）：
缓冲液10μL + 酶混合液2μL + 探针1μL + 引物2μL + 模板5μL。
PCR程序：
逆转录：50℃ 30分钟（若含RNA模板）；
预变性：94℃ 10分钟；
扩增：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环，FAM通道采集信号）。
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性判定：
阳性：Ct≤35，扩增曲线呈典型S型；
阴性：Ct≥40；
可疑（35<Ct<40）：需重复检测。
注意事项
分区操作：试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行，避免污染。
阳性对照需最后加入，且避免反复冻融。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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