黑芝麻探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 黑芝麻探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Sesami Nigrum Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5095 |
产品用途
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（探针法），专用于黑芝麻（Semen sesami nigrum）的快速、高灵敏度鉴定，适用于科研领域，不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。
高灵敏度与特异性：引物及探针针对黑芝麻高度保守区设计，避免与其他物种DNA交叉反应。
内置对照：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），可区分假阴性结果。
稳定可靠：50次20μL体系反应，批间差异小，重复性好。
安全设计：阳性对照为无传染性DNA片段，降低实验风险。
规格及成分
| 成分编号 | 成分名称 | 规格 | 包装颜色 |
| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL | 本色管 |
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 试剂三 | 黑芝麻PCR引物混合液 | 100 μL | 白盖 |
| 试剂四 | 黑芝麻qPCR探针 | 50 μL | 棕色盖 |
| 试剂五 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 红盖 |
| 附赠 | 使用手册 | 1份 | - |
自备试剂：样品DNA、超纯水、离心管及带芯枪头。
实验步骤
1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）
标记离心管（7-2号），每管加45 μL稀释液。
依次从7号管（10⁷拷贝/μL）稀释至2号管（10²拷贝/μL），冰上保存。
2. 样品DNA制备
建议设置N+2个提取（含阳性/阴性对照），使用兼容的DNA提取试剂盒。
3. qPCR反应体系（20μL）
| 成分 | 样品管（N+2） | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| 2×Probe MagicMix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
| qPCR探针 | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| 样品DNA/标准品 | 7 μL | - | 7 μL |
| 超纯水 | - | 7 μL | - |
4. PCR程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min |
| 40循环 | 95℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性分析：
阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35；35<Ct<40需复测。
阳性对照需有典型扩增曲线且Ct≤30。
储存与运输
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输方式：低温干冰运输。
注意事项
操作需在独立区域进行，避免交叉污染。
本产品仅限科研使用。
不同成分可能略有差异，请以实际包装说明为准。
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