产品特点

高灵敏度:可检测低至几百拷贝/反应的靶序列,适用于微量样本分析。
特异性强:基于芡实保守序列设计的引物及探针,避免与其他物种交叉反应。
即开即用:预混缓冲液、酶及对照,用户仅需提供DNA模板。
防污染设计:一管式闭管检测,减少气溶胶污染风险。
适用范围:科研用途(不可用于临床诊断)。
产品名称 | 芡实探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Euryales Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5010 |

试剂盒组成

| 成分 | 规格/含量 | 功能说明 |
| qPCR缓冲液 | 500μL | 含Mg²⁺、dNTPs等反应组分 |
| Taq酶混合液 | 100μL | 含热启动DNA聚合酶 |
| 荧光探针 | 50μL | 5'端FAM标记,3'端淬灭 |
| 引物混合液 | 100μL | 特异性扩增芡实靶序列 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 标准曲线制备及质控 |
| 模板稀释液 | 1mL | 标准品梯度稀释 |
实验步骤

标准曲线制备:
将阳性对照按10倍梯度稀释(10²~10⁷拷贝/μL),每个梯度独立操作以避免污染。
样本DNA提取:
建议设置阴性对照(NC,超纯水)和阳性对照(PC,稀释后的标准品)。
qPCR反应体系(20μL):
依次加入10μL缓冲液、2μL酶混合液、1μL探针、2μL引物、5μL模板DNA。
反应程序:
逆转录(50℃, 30min)→ 预变性(94℃, 10min)→ 40循环扩增(94℃ 15s, 60℃ 60s)。
质控标准
阴性对照:无扩增曲线或Ct值≥40。
阳性对照:Ct值≤32,扩增曲线呈典型指数期。
无效实验判定:若阳性质控未达标或阴性对照出现扩增,需重复实验。
注意事项

操作需在无核酸污染环境中进行,建议使用专用PCR实验室及一次性耗材。
试剂解冻后需充分混匀,分装避免反复冻融。
探针避光保存,防止荧光淬灭。
不同仪器需优化退火温度(建议范围55~65℃)。
常见问题
无扩增信号:检查模板完整性或试剂活性,重新提取DNA。
非特异性峰:优化退火温度或引物浓度。
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关键字: 芡实;探针法;PCR鉴定试剂盒;
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