产品原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术，采用探针法检测枳实特异性核酸序列。探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团，通过Taq酶的5'→3'核酸外切酶活性切割探针，释放荧光信号，实现靶序列的定量与定性分析。
产品名称 | 枳实探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Citrus aurantium Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4903 |
产品特点
高灵敏度：优化的引物和探针可检测低至10拷贝/μL的模板。
特异性强：靶向枳实保守序列，无交叉反应。
即开即用：预混缓冲液、酶及对照，仅需提供样品RNA。
双重质控：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）和阴性对照，避免假阴性。
适用范围：科研用途（非临床）。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 | 功能 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL | 反应体系基础液 |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100 μL | 含逆转录酶、Taq酶 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL | 标准曲线稀释 |
| 枳实引物混合液 | 100 μL | 特异性扩增 |
| 枳实qRT-PCR探针 | 50 μL | 荧光信号检测 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 质控标准 |
| 说明书 | 1份 | 操作指南 |
操作步骤
1. 标准曲线制备（10倍梯度稀释）
标记离心管（7-2号），依次稀释阳性对照至10²-10⁷拷贝/μL，冰上保存。
2. RNA提取
建议设置N+2样本（含阴/阳性对照），使用兼容的RNA提取试剂盒。
3. qRT-PCR反应（20 μL体系）
反应体系：
样品管：10 μL缓冲液 + 2 μL酶混合液 + 1 μL探针 + 2 μL引物 + 5 μL RNA模板。
阴性对照：以水替代模板。
标准曲线管：加入梯度稀释液。
反应程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 40循环 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性检测：
阳性：Ct≤35，扩增曲线明显。
阴性：Ct≥40。
可疑（35<Ct<40）：需复测。
注意事项
分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。
使用带滤芯枪头，每次更换避免气溶胶污染。
阳性对照需最后加入，单独存放。
废弃物料需经消毒处理（如10%次氯酸钠）。
声明：本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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关键字： 枳实;探针法;PCR鉴定试剂盒;