炮姜探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于炮姜（Rhizoma zingiberis preparatum）的特异性鉴定，具有高灵敏度、高特异性和稳定性，适用于科研领域。试剂盒包含预混反应体系、引物探针、阳性对照及核酸释放剂，支持40μL或20μL反应体系，可完成50次检测。

产品特点

即开即用：预混MasterMix含Taq酶、dNTPs、缓冲液等，仅需加入模板DNA和引物探针。

高特异性：引物及探针针对炮姜保守序列设计，无交叉反应。

灵敏度优异：检测下限达10³拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10¹~10⁶拷贝/μL）。

质量控制：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）和阴性对照，区分假阴性结果。

兼容性：适配常规RNA/DNA提取方法，或配合核酸释放剂直接使用。

规格与成分

| 成分 | 规格/包装量 | 保存条件 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | -20℃ |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | -20℃ |

| 炮姜引物探针混合液 | 100 μL（白盖） | -20℃ |

| 阳性对照（10⁸拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | -20℃ |

| 核酸释放剂（试用装）| 20次（1 mL，绿盖） | -20℃ |

实验步骤

1. 标准曲线制备（定量分析）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10⁶~10¹拷贝/μL），每个浓度单独分装，避免污染。

2. 样本处理

DNA提取：使用柱式提取法或核酸释放剂，建议设置阴性对照（水）和阳性对照（稀释阳性模板）。

3. PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×PCR MagicMix | 10 |

| 引物探针混合液 | 0.5 |

| 模板DNA | 2 |

| 超纯水 | 补足至20 |

4. 扩增程序

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃, 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃, 15 s | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃, 30 s | |

数据分析

定量检测：以标准曲线Ct值计算模板浓度。

定性检测：Ct≤36为阳性，Ct≥40为阴性；36<Ct<40需复测。

注意事项

操作分区进行（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。

试剂使用前需完全溶解并混匀，短暂离心后置于冰上。

阳性对照单独存放，严禁与其他组分接触。

废弃物料需经10%次氯酸或75%酒精处理。

运输与保存

运输：低温干冰或冰袋运输。

保存：-20℃避光保存，有效期12个月。

科研用途：本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。

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