覆盆子探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 覆盆子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Rubi Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5123 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，用于覆盆子核酸的特异性检测，适用于科研用途，如物种鉴定或病原体辅助诊断（如牛白血病病毒检测）。不适用于临床诊断。
检验原理
技术核心：针对覆盆子基因保守区域设计特异性引物及荧光探针，通过实时监测PCR扩增过程中的荧光信号（FAM通道），实现定性/定量分析。
灵敏度：可检测低至10 ng的DNA模板，特异性＞99%（与测序法比对）。
试剂组成
| 组分 | 规格（示例） | 备注 |
| 覆盆子扩增液 | 25 μL/管 | 含引物、探针 |
| 反应液 | 975 μL/管 | 预混PCR Master Mix |
| 阳性质控品 | 50 μL/管 | 人工合成DNA片段 |
| 阴性质控品 | 50 μL/管 | 无核酸酶水 |
操作步骤
样本处理：
采集组织、血液或拭子样本，建议使用商品化DNA提取试剂盒（如Hypure病毒基因组提取试剂盒）。
反应体系配制（以25 μL体系为例）：
反应液19.5 μL + 扩增液0.5 μL + 模板DNA 5 μL。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 3 min；
40循环：95℃ 15 sec → 55℃ 30 sec（采集荧光信号）。
仪器兼容性：ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
结果判读
| 结果类型 | Ct值范围 | 判定标准 |
| 阳性 | ≤35 | 明显指数扩增曲线 |
| 可疑 | 35＜Ct＜38 | 建议复测，复核后Ct＜40则判为阳性 |
| 阴性 | ≥40或无Ct值 | 无扩增曲线 |
质控要求：
阴性质控品：Ct=40或无信号；
阳性质控品：Ct≤35且曲线呈指数增长。
注意事项
避免交叉污染，分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）。
反复冻融≤7次，分装保存以延长试剂寿命。
可疑样本需复测确认，建议使用新鲜提取的核酸模板。
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