人线粒体DNA 探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 人线粒体DNA 探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Human Mitochondrial DNA Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5281 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专为检测人线粒体DNA设计，适用于科研领域（严禁临床使用）。线粒体DNA与核DNA共同调控细胞功能，其检测对能量代谢、遗传病等研究具有重要意义。试剂盒具有高灵敏度（可检测低至50拷贝/μL）、高特异性（经生物信息学验证，无交叉反应）及即开即用特点，支持定性和定量分析（线性范围达5个数量级）。
规格与成分
核心组分
2×Probe qPCR MagicMix（500 μL）
荧光PCR专用模板稀释液（1 mL）
人线粒体DNA引物混合液（100 μL）
探针（50 μL，棕色管避光保存）
阳性对照（50 μL，1×10⁸拷贝/μL）
使用手册（1份）
包装规格
50次/盒（20 μL反应体系）
运输与保存
低温运输，-20℃保存，有效期12个月。
避免反复冻融，探针需避光。
实验流程
标准曲线制备（6个梯度稀释，10²~10⁷拷贝/μL）：
使用阳性对照按10倍梯度稀释，独立操作避免污染。
样本处理：
样本类型：血清、血浆、组织匀浆（需PBS冲洗、匀浆离心取上清）或细胞培养物。
阴性/阳性对照设置：每批次需包含阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。
PCR反应体系（20 μL）：
| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| 2×Probe qPCR Mix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
| 探针 | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| 模板DNA/标准品/水 | 7 μL | 7 μL水 | 7 μL标准品 |
扩增程序：
预变性：95℃ 3分钟；
40循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）。
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性分析：阴性对照Ct≥40，阳性对照需有典型扩增曲线。
注意事项
操作需在独立区域进行，避免气溶胶污染。
酶标板开封后需密封保存，洗涤液结晶可加热溶解。
建议重复检测以提高准确性，避免使用过期试剂。
免责声明
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。实验结果需结合其他方法验证。
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