小鼠线粒体DNA探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

小鼠线粒体DNA探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测小鼠（Mus musculus）线粒体DNA残留，适用于科研用途，不可用于临床诊断。试剂盒包含优化引物、探针及对照体系，具有高灵敏度和特异性，可进行定性和定量分析（线性范围≥5个数量级）。

产品规格

检测方法：探针法荧光定量PCR（50次反应，20μL体系）

存储条件：-20℃避光保存

保质期：未开封12个月

主要组分：

探针法qPCR缓冲液（500μL）

qPCR酶混合液（50μL）

荧光PCR专用模板稀释液（1mL）

线粒体DNA特异性引物-探针干粉（50T）

阳性对照（1×10^7拷贝/μL，50μL）

操作流程

标准曲线制备（10^1–10^6拷贝/μL梯度稀释）：

使用阳性对照进行10倍系列稀释，独立操作避免污染。

样品DNA提取：

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），兼容多数DNA纯化试剂盒。

qPCR反应设置：

定量分析需N+9个反应管（含6个标准曲线点、1个阴性对照）。

反应程序：

50℃ 10min（逆转录，若需）；

95℃ 10min预变性；

40循环（95℃ 15sec，60℃ 60sec，采集FAM信号）。

数据分析

定量检测：以标准曲线log浓度对应Ct值计算样品浓度。

定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性，39–40间需复测。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增）以避免污染。

使用带芯枪头，反应液避光保存，彻底离心去除气泡。

实验后需用10%次氯酸或75%酒精消毒工作区。

局限性

结果受样本质量、提取效率及操作规范影响。

基因突变或试剂保存不当可能导致假阴性/假阳性。

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