预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，专用于椿皮核酸的体外定性检测，适用于科研领域对椿皮感染的辅助分析。检测结果仅供研究参考，不可用于临床诊断或治疗。
产品名称 | 椿皮探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Cortex Ailanthi Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5157 |
检验原理
通过设计椿皮基因保守区特异性引物及探针，在PCR扩增过程中，Taq酶切割探针释放荧光信号，实时监测荧光强度实现定性或定量分析。探针5'端标记FAM荧光基团，3'端淬灭基团，扩增时荧光信号与产物量成正比。
试剂组成
探针法qRT-PCR缓冲液（500μL）
酶混合液（100μL）
荧光PCR模板稀释液（1mL）
椿皮引物混合液（100μL）
椿皮qRT-PCR探针（50μL）
阳性对照（1×10^8拷贝/μL，50μL）
说明书（1份）
储存条件及有效期
-20℃避光保存，有效期12个月；避免反复冻融（建议分装保存）。
适用仪器
兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪，需配备FAM检测通道。
自备耗材
无核酸酶离心管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、移液器、冰盒等。
样品要求
样本类型：组织、血液、分泌物等（需避免交叉污染）。
保存：短期-20℃，长期-70℃；运输需2-8℃冰袋。
实验步骤
标准曲线制备（6个梯度稀释阳性对照，10^2-10^7拷贝/μL）。
RNA提取：推荐柱式提取法，制备阴性/阳性对照。
反应体系配制（20μL/管）：
缓冲液10μL + 酶混合液2μL + 探针1μL + 引物混合液2μL + 模板RNA 5μL。
PCR扩增程序：
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
40循环：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）
结果判读
定量分析：以标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析：
阳性：Ct≤35且扩增曲线典型；
阴性：Ct≥40；
可疑（35<Ct<40）：需复测确认。
注意事项
不同批号组分禁止混用。
操作分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）避免污染。
阳性对照最后添加，防止气溶胶污染。
本产品仅限科研使用。
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