陈皮探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品用途

科研实验，用于陈皮DNA的定性或荧光定量PCR检测。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融；有效期12个月。

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

试剂盒组成

不同的组分略有差异，核心成分包括：

探针法qPCR缓冲液（含荧光染料，如FAM通道兼容染料）。

qPCR酶混合液（含热启动Taq DNA聚合酶）。

引物-探针干粉（特异性靶向陈皮保守基因序列）。

阳性对照（无传染性DNA片段，浓度10^7拷贝/μL）。

模板稀释液（用于标准曲线制备）。

可选附件：部分提供DNA提取试用装（如病毒DNAout裂解液）。

操作流程

1. 样品DNA制备

使用兼容的DNA提取试剂盒纯化样品DNA，或采用试剂盒提供的裂解液（如适用）。

建议设置阴性对照（超纯水）和阳性对照（试剂盒提供）。

2. 标准曲线制备（定量检测需选做）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），标记为6个离心管，每管加入45μL稀释液及5μL上一浓度对照，涡旋混匀。

注意：稀释操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

3. qPCR反应设置（20μL体系）

| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |

| qPCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |

| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |

| 引物-探针混合液 | 3 | 3 | 3 |

| 模板DNA/对照 | 5 | — | 5（对应稀释度） |

| 超纯水 | — | 5 | — |

4. PCR程序

预变性：95℃ 1分钟。

扩增循环（30–40次）：

95℃ 15秒（变性）

60℃ 15秒–1分钟（退火/延伸，采集荧光信号）。

仪器兼容性：适配ABI 7500、LightCycler 480等主流荧光PCR仪（部分机型需ROX校正）。

数据分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样品浓度。

定性检测：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39。

样品Ct≤39判为阳性，≥40判为阴性；临界值（39–40）需复测。

注意事项

避免试剂反复冻融，分装后使用。

操作时需穿戴防护装备，防止气溶胶污染。

不同的引物探针设计可能差异，需根据实验目的选择。

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。

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