哺乳动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 哺乳动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mammalian-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5290 |
产品概述
本试剂盒采用探针法实时荧光定量PCR技术，专为检测食品及其他材料中哺乳动物源性成分而设计。通过针对哺乳动物高度保守基因序列的特异性引物和探物探针，实现对样品中哺乳动物DNA成分的快速、灵敏检测，适用于食品真伪鉴定和安全监管。
预期用途：科研用，检测食品及其他材料中哺乳动物源性成分
技术原理
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术：
特异性引物设计：针对哺乳动物源性成分高度保守区设计引物，确保检测特异性
荧光探针系统：探针5'端标记报告荧光基团，3'端标记淬灭基团，PCR扩增时Taq酶水解探针释放荧光信号
实时监测：通过qPCR仪实时监测荧光信号变化，实现定量分析
产品组成
2×Probe qPCR Mix
哺乳动物源性成分引物探针混合液
阳性对照（1×10⁸ copies/μL）
阴性对照（无核酸酶水）
RNase-Free Water
操作流程
样本处理
DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒提取样品DNA
质量控制：建议测定DNA浓度和纯度（A260/A280比值1.8-2.0）
标准曲线制备（定量检测时）
标记6支离心管（7-2号）
7号管加90μL无核酸酶水，其余各加45μL
取10μL阳性对照加入7号管，混匀后取5μL转移至6号管，依次稀释至2号管
最终获得10⁷-10² copies/μL的6个梯度标准品
PCR反应体系配制（20μL体系）
| 组分 | 体积(μL) |
| 2×Probe qPCR Mix | 10 |
| 引物探针混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| RNase-Free Water | 6 |
扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30sec | 40 |
| 荧光采集 | 60℃ | - | - |
注：不同仪器可能需调整参数，请参照仪器说明书
结果分析
定量分析
以阳性对照浓度的log值为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线
通过样品Ct值计算DNA浓度
定性分析
阳性对照：Ct值≤30，典型S型扩增曲线
阴性对照：Ct值≥38或无Ct值
样品判定：
Ct值≤35：阳性
Ct值≥38：阴性
35<Ct值<38：需复测，复测Ct值<40且有扩增曲线判为阳性
性能参数
检测限：≤10 copies/反应
线性范围：10²-10⁷ copies/μL（R²≥0.99）
特异性：不与常见非哺乳动物DNA发生交叉反应
重复性：Ct值变异系数<5%
注意事项
实验分区操作：样本处理、试剂配制、扩增分析应在独立区域进行
使用带滤芯吸头，避免气溶胶污染
所有组分使用前需完全溶解并混匀，短暂离心后使用
反应液避光保存，避免反复冻融（≤3次）
实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作区
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断
运输与储存
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）
储存条件：-20℃避光保存
有效期：12个月
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