哺乳动物源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于检测哺乳动物源性成分（如猪、绵羊等物种特异性基因），适用于科研用途（不可用于临床诊断）。试剂盒包含优化的引物、预混反应液及阳性对照，具有高灵敏度和特异性，可同时支持定性和定量分析（线性范围≥5个数量级）。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度与特异性：引物针对哺乳动物保守基因区域设计，避免交叉反应。

内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，区分假阴性结果。

稳定性：-20℃保存条件下有效期为12个月。

兼容性：支持常见荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 说明 |

| 2×qPCR预混液 | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs及聚合酶 |

| 模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品或样本稀释 |

| 物种特异性引物混合物 | 100 μL（白盖） | 针对目标基因设计 |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | 无传染性DNA片段 |

| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |

操作步骤

1. 样本制备

建议使用配套基因组DNA提取试剂盒获取模板。

若需定量分析，需制备标准曲线（建议梯度：10^2–10^7拷贝/μL）。

2. 反应体系配置（20 μL体系）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR预混液 | 10 |

| 引物混合物 | 0.8 |

| 模板稀释液 | 0.2 |

| DNA模板/阳性对照 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

注意：

所有操作需在冰上进行，避免反复冻融试剂。

建议设置3次技术重复及阴性对照（NTC）。

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃, 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃, 15 s | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃, 30 s | |

数据分析

定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量检测：通过标准曲线计算模板拷贝数。

注意事项

避免试剂污染，分区操作（样本制备区、反应配置区、扩增区）。

阳性对照需单独存放，稀释时使用独立耗材。

废弃组分需按生物安全规范处理。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（解冻后需离心混匀）。

运输条件：冰袋或干冰运输。

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