产品概述
本试剂盒基于基因探针法荧光定量PCR技术开发，专用于高灵敏、高特异性的DNA靶标检测。适用于定性或定量分析，线性范围覆盖5个数量级，检测灵敏度可达100拷贝/反应。
产品名称 | 基因探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Universal Gene Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4867 |
产品规格
规格：50次/盒（20μL体系）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；需低温运输。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括ABI系列、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等。
试剂盒组分
预混PCR反应液（含优化引物及探针）
荧光PCR专用模板稀释液
阳性对照（无传染性DNA片段，1×10^7拷贝/μL）
使用说明书
检验原理
特异性：引物针对靶基因高度保守区设计，避免交叉反应。
灵敏度：检测下限为100拷贝/反应，提供阳性对照以排除假阴性。
闭管操作：一管式设计降低污染风险。
操作步骤
1. 标准曲线制备（独立区域操作）
使用阳性对照进行10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），标记6管，依次加入稀释液并震荡混匀，冰上保存备用。
2. 样本处理
建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照）。
核酸提取：推荐使用兼容的核酸纯化试剂盒，按说明书操作。
3. qPCR反应体系（20μL）
样品管：7μL待测DNA模板 + 10μL预混液 + 2μL引物混合液 + 1μL探针。
阴性对照：以超纯水替代模板。
标准曲线管：加入梯度稀释的标准品。
4. 扩增程序
按仪器说明书设置循环参数（建议：95℃预变性5分钟；95℃ 15秒，60℃ 1分钟，40循环）。
数据分析
定量：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性：Ct≤30为阳性，≥35为阴性；30<Ct<35需复测。
注意事项
避免试剂反复冻融，使用前充分离心。
操作分区进行（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阳性对照需最后加入，避免交叉污染。
质量控制
阴性对照Ct值应≥35，阳性对照Ct值≤30且扩增曲线典型。
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