预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，用于半夏核酸的特异性检测，适用于科研场景下的物种鉴定、基因表达分析等，不适用于临床诊断。
产品名称 | 半夏探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Rhizoma Pinelliae Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5190 |
检测原理
探针法原理：
针对半夏基因保守区域设计特异性引物及探针（5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团）。
PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。
技术优势：
高特异性：引物及探针经生物信息学优化，避免交叉反应。
高灵敏度：最低检测限可达10³拷贝/μL。
快速检测：全程约3-4小时。
试剂盒组成
| 组分 | 规格（示例） | 功能说明 |
| 扩增反应液 | 975μL×1管 | 含PCR缓冲液、dNTPs等 |
| 引物探针混合液 | 100μL×1管 | 特异性引物及探针 |
| 阳性质控品 | 50μL×1管（1×10⁸拷贝/μL） | 人工合成DNA片段 |
| 阴性质控品 | 50μL×1管 | 无核酸酶水 |
| 荧光PCR专用稀释液 | 1mL×1瓶 | 标准曲线稀释 |
注：不同品牌组分可能略有差异，具体以实际产品为准。
样本要求
样本类型：组织、细胞、血液、细菌培养物等（需避免DNA/RNA降解）。
样本处理：
新鲜样本建议-70℃长期保存，短期可存于-20℃。
推荐使用商品化核酸提取试剂盒（如病毒基因组DNA提取试剂盒）。
注意事项：
避免样本交叉污染，操作时使用无核酸酶耗材。
不建议直接提供预提取的DNA/RNA样品。
实验步骤
核酸提取：按标准方法提取样本DNA/RNA。
试剂配制：
解冻试剂后涡旋混匀，离心分装（每反应体系含19.5μL反应液+0.5μL扩增液）。
加样：加入5μL模板DNA/RNA及对照品。
PCR扩增：
程序设置：
预变性：95℃ 3分钟 → 循环扩增（40 cycles：95℃ 15秒 → 55℃ 30秒，采集FAM通道信号）。
结果分析：
阳性判定：Ct值≤35；可疑样本（Ct 35-40）需复测。
定量分析需通过标准曲线计算拷贝数。
注意事项
不同批号试剂不可混用。
实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照需最后加样，防止污染。
适用仪器
ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
声明
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
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