产品特点

高特异性:引物与探针针对半边莲DNA保守区域设计,无交叉反应。
灵敏度高:可检测低至10²拷贝/μL的模板,线性范围达5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
即开即用:预混含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液及荧光探针,仅需添加模板。
质量控制:提供无传染性阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)及阴性对照,区分假阴性结果。
兼容性:适配多数DNA提取试剂盒,裂解液可直接作为PCR模板。
产品名称 | 半边莲探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Herba Lobeliae Chinensis Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5193 |

试剂盒组成

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 1 mL(红盖) | -20℃ |
| 半边莲引物探针混合液 | 100 μL(白盖) | -20℃ |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) | -20℃ |
| 超纯水 | 1 mL(亮黄色) | 室温 |
| 核酸释放剂(试用装) | 1 mL(绿盖) | 4℃ |
实验步骤

1. 标准曲线制备
梯度稀释阳性对照至10⁷~10²拷贝/μL(6个浓度点),冰上操作避免降解。
2. 样本DNA制备
建议设置N+2个样本(含阴性/阳性对照),纯化后调整浓度至20~100 ng/μL。
3. qPCR反应体系(20μL)
| 组分 | 体积(μL) |
| 2×Probe MasterMix | 10 |
| 引物探针混合液 | 0.8 |
| 模板DNA | 2 |
| 超纯水 | 7.2 |
程序设置:
预变性:95℃ 5 min
循环:95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec(40循环,采集荧光信号)
4. 数据分析
定量:以Ct值绘制标准曲线,计算样本拷贝数。
定性:Ct≤35为阳性,Ct≥40为阴性;35<Ct<40需复测。
注意事项

保存与运输:-20℃避光保存,避免反复冻融;低温运输。
污染控制:分区操作(试剂准备/样本处理/PCR扩增),使用带滤芯枪头。
有效期:12个月(生产日期见标签)。
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关键字: 半边莲;探针法;PCR鉴定试剂盒;
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