花生源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 花生源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Peanut-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5317 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测样品中花生源性成分的核酸，适用于科研领域的定性及定量分析。试剂盒包含优化的引物探针组合、阳性对照及反应缓冲体系，具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他微生物DNA的交叉反应。
试剂盒组成
| 成分 | 规格/数量 |
| qPCR缓冲液 | 500μL |
| qPCR酶混合液 | 50μL |
| 引物-探针干粉 | 50次反应 |
| 阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50μL |
| 模板稀释液 | 1mL |
操作步骤
1. 标准曲线制备
稀释阳性对照：按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），使用带滤芯枪头，独立操作区避免污染。
标记离心管：6管（6号至1号），依次加入稀释液并混匀，冰上保存。
2. 样本DNA提取
建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC），采用兼容的DNA提取试剂盒。
3. qPCR反应体系（20μL）
| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |
| qPCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 引物-探针混合液 | 3 | 3 | 3 |
| 模板DNA | 5 | — | — |
| 标准品/超纯水 | — | 5（水） | 5（梯度标准品） |
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 10分钟 |
| 循环（40次） | 94℃ | 15秒 |
| | 60℃ | 1分钟（采集FAM信号） |
结果分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本拷贝数。
定性检测：
阳性：Ct≤39，扩增曲线典型；
阴性：Ct≥40；
灰区（39<Ct<40）：需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。
防污染措施：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。
运输与储存：避免反复冻融，解冻后需离心混匀。
局限性
检测结果受样本质量、提取方法及操作规范影响。
基因突变可能导致假阴性；污染可能导致假阳性。
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关键字： 花生源性成分;探针法荧光定量;PCR试剂盒;
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