鸭源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鸭源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Duck-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5330 |
检测原理
基于探针法荧光定量PCR技术，通过Taq酶的5’核酸外切酶活性切割特异性探针（5’端标记荧光报告基团，3’端标记淬灭基团），释放荧光信号。实时监测扩增过程中荧光强度变化，实现对鸭源性成分的定量及定性分析。
产品组成
| 成分 | 规格 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |
| 鸭源性成分引物-探针混合液 | 100μL |
| 鸭源性成分qRT-PCR探针 | 50μL |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL |
| 说明书 | 1份 |
产品特点
高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应。
高特异性：引物探针针对鸭源性成分保守区设计，无交叉反应。
即开即用：用户仅需提供样品RNA模板。
双重用途：支持定性与定量检测（线性范围10²~10⁷拷贝/μL）。
质量控制：含阳性对照，可排除假阴性干扰。
实验步骤
1. 标准曲线制备（10²~10⁷拷贝/μL梯度稀释）
使用阳性对照及专用稀释液进行6个10倍梯度稀释，冰上保存备用。
2. 样品RNA提取
建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC），提取方法需兼容病毒RNA纯化。
3. qRT-PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 体积（μL） |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 引物-探针混合液 | 2 |
| 探针 | 1 |
| 样品RNA/标准品/阴性对照 | 5 |
4. 反应程序
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性检测：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤35为有效结果。
注意事项
操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。
阳性对照为无传染性DNA片段，不可用于活体实验。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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