技术原理与特点
原理：基于探针法荧光定量PCR技术，通过特异性引物和FAM标记探针靶向扩增白鲜皮基因组中560 bp的保守序列，结合实时荧光信号检测实现定性与定量分析。
特点：
高特异性：引物及探针经优化设计，仅扩增白鲜皮DNA，无交叉反应。
高灵敏度：最低检测限达10 ng DNA模板。
快速简便：预混试剂即开即用，3小时内完成检测，PCR产物可直接电泳。
防污染设计：含dUTP/UDG酶系统（部分型号），降低假阳性风险。
产品名称 | 白鲜皮探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Cortex Dictamni Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5197 |
试剂盒组分
| 成分 | 规格/包装 | 用途说明 |
| PCR预混液（含探针） | 1 mL（2×浓度） | 含Taq酶、dNTPs、Mg²⁺ |
| 阳性对照DNA | 50 μL（1×10⁸拷贝/μL） | 标准曲线制备与质控 |
| 阴性对照 | 1 mL | 排除污染及体系验证 |
| 核酸释放剂（可选） | 1 mL | 简化样本前处理 |
| 使用说明书 | 1份 | 操作流程与数据分析 |
操作步骤
样本制备：
使用柱式法或试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥50 ng/μL。
阳性对照需梯度稀释（10⁶~10¹拷贝/μL）以绘制标准曲线。
PCR反应体系（25 μL）：
预混液（2×） 12.5 μL
引物/探针混合液 1 μL
DNA模板 2 μL
ddH₂O 补至25 μL
扩增程序（ABI 7500为例）：
50℃ 10 min（UDG处理，可选）
95℃ 3 min（预变性）
95℃ 10 sec → 60℃ 1 min（荧光采集），共40循环。
结果分析
阈值设定：阈值线需高于阴性对照扩增曲线最高点。
质控标准：
阴性对照：Ct≥40或无Ct值。
阳性对照：Ct≤35且呈典型S型曲线。
判读规则：
阳性：Ct<38，指数期明显。
可疑：38≤Ct<40，需复测确认。
阴性：Ct≥40或无扩增。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。
试剂解冻后需涡旋混匀并短暂离心，避免反复冻融。
实验废弃物需经10%次氯酸或75%乙醇消毒处理。
应用范围
科研用途：白鲜皮药材真伪鉴定、物种特异性分析等。
不适用于：临床诊断或医疗用途。
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