附子探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 附子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Aconiti Lateralis Preparata Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5121 |
产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于**附子（Radix aconiti lateralis preparata）**的快速、高灵敏度鉴定。通过特异性引物和探针设计，可实现对附子DNA的定性与定量检测，适用于科研用途（不可用于临床）。
产品特点
高灵敏性：优化的引物和探针组合，检测限低至10^2拷贝/μL。
特异性强：靶向附子保守序列，避免与其他微生物的交叉反应。
即开即用：预混缓冲液和酶体系，仅需提供样品DNA/RNA模板。
双重检测模式：支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级。
内控设计：含阳性对照（无传染性DNA片段），可区分假阴性结果。
包装规格
规格：50次/盒（20μL反应体系）。
主要成分：
探针法qPCR缓冲液
qPCR酶混合液
荧光PCR专用模板稀释液
特异性引物-探针干粉
阳性对照（10^7~10^8拷贝/μL）
操作流程
1. 标准曲线制备（定量检测适用）
将阳性对照按10倍梯度稀释（10^1~10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。
2. 样品处理
提取待测样本DNA/RNA，建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。
3. PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 样品管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |
| qPCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 探针/引物混合液 | 3 | 3 | 3 |
| 模板 | 5 | — | — |
| 标准曲线稀释液 | — | — | 5 |
| 超纯水 | — | 5 | — |
4. 扩增程序
逆转录（如适用）：50℃ 30 min
预变性：94℃ 10 min
40循环：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM通道信号）
结果判读
定量分析：以Ct值对log浓度绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性分析：
阳性：Ct≤39，扩增曲线典型；
阴性：Ct≥40或无扩增。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
局限性：
结果受样本质量、提取方法及操作规范影响；
基因突变可能导致假阴性。
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