熊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 熊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bear-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5331 |
预期用途
用于检测鲍鱼等样本中熊源性成分的DNA，适用于科研实验，不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测样本DNA/RNA即可进行检测。
高特异性：引物及探针基于熊源性成分保守序列设计，无交叉反应。
高灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的靶标DNA。
操作简便：一管式荧光定量PCR，减少污染风险。
对照齐全：含阳性对照（1×10^8拷贝/μL）及阴性对照，便于结果判读。
试剂盒组成
上研生版本：
荧光PCR缓冲液、酶混合液、模板稀释液
引物混合液、探针、阳性对照
生物版本：
探针法qRT-PCR缓冲液、酶混合液、引物探针混合液
阳性对照（无传染性DNA片段）
使用方法
1. 标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL为例）
稀释步骤：
标记7管（1~7号），1号管加90μL稀释液，其余加45μL。
从阳性对照（10^8拷贝/μL）取10μL加入1号管，依次10倍稀释至6号管，7号管为阴性对照。
注意事项：
使用独立操作区及带滤芯吸头，避免交叉污染。
稀释后分装保存于-20℃，避免反复冻融。
2. 样本DNA/RNA制备
推荐使用配套裂解液或兼容的核酸提取试剂盒，确保纯度满足PCR要求。
3. PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| PCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探针/引物混合液 | 1-2μL | 1-2μL | 1-2μL |
| 模板 | 5μL | - | - |
| 标准曲线稀释液 | - | - | 5μL |
| 超纯水 | - | 5μL | - |
4. 反应程序
逆转录（若适用）：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
扩增（40循环）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）
结果分析
标准曲线：以阳性对照拷贝数对数与Ct值绘制，要求R²≥0.98。
判读标准：
阳性：Ct值<30；
可疑：30≤Ct≤35，需复测；
阴性：Ct值≥35或无信号。
注意事项
操作环境：需在洁净区域进行，使用滤芯吸头。
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
应用限制：仅限科研使用，不可用于临床或诊断目的。
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