蛇源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 蛇源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Snake-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5340 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发,专用于蛇源性成分的定性与定量检测。适用于科研用途,具有高灵敏性、高特异性及操作便捷性,可兼容多数核酸纯化方法。

试剂盒组成
荧光PCR反应液(含优化引物及探针)
阳性对照(1×10^8拷贝/μL,无传染性DNA片段)
阴性对照(无核酸酶水)
标准曲线稀释液
其他辅助试剂(详细组分以实际说明书为准)
操作流程
标准曲线制备(定量分析)
标记离心管:编号6管(7至2号或6至1号,依版本不同)。
梯度稀释:
7号管加入5 μL阳性对照(1×10^8拷贝/μL)与45 μL稀释液,震荡混匀,得1×10^7拷贝/μL标准品。
依次稀释至1×10^2拷贝/μL,冰上保存。
样本DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA,设置N+2管(含阳性/阴性对照)。
阳性对照建议使用试剂盒提供的DNA片段稀释液。
qPCR反应体系(20 μL/反应)
定量分析:需N+9管(N+2样本管、6标准曲线管、1阴性对照管)。
定性分析:仅需N+4管(N+2样本管、1标准曲线管、1阴性对照管)。
反应条件:
预变性:95℃ 5分钟;
扩增:40循环(95℃ 15秒,60℃ 60秒,荧光采集)。
数据分析
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,计算样本浓度。
定性检测:
阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤30(或36,依版本不同)。
样本Ct≤35为阳性,≥40为阴性;35-40需复测确认。
注意事项
分区操作:试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行,避免交叉污染。
防降解措施:样本处理需在0-4℃下完成,使用无核酶耗材。
质控要求:每实验必须包含阴/阳性对照。
保存条件:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(≤7次),有效期12个月。
适用仪器
兼容ABI系列荧光定量PCR仪(参数设置:无ROX校正,淬灭基因选择None)。
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