人恶性黑色素瘤细胞;A375-LUC-EGFP
商品属性
产品名称 | 人恶性黑色素瘤细胞;A375-LUC-EGFP | 英文名称 | A375-LUC-EGFP |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11324 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
背景特性：由A375细胞系经基因改造，稳定表达荧光素酶（LUC）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP），适用于活体成像、肿瘤转移及药物筛选研究。
生长特性：贴壁生长，遗传改造后具有无限增殖潜能，需定期检测基因稳定性。
纯度要求：细胞纯度≥90%，经检测不含HIV、HBV、HCV、支原体及细菌污染。
培养条件
培养基：DMEM（高糖）+ 10%胎牛血清（FBS）+ 1%青霉素-链霉素双抗。
培养环境：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），液氮长期保存。
细胞处理与传代
细胞复苏与接收
运输状态：冻存管（干冰运输）或贴壁培养瓶（灌满培养基密封）。
接收操作：
冻存细胞：37℃水浴快速复苏，离心后重悬接种。
贴壁细胞：75%酒精消毒瓶身，静置3-4小时稳定状态后观察。
质检要求：显微镜下拍照记录（40×、100×、200×），前3天状态为售后依据。
传代步骤（汇合度80%时进行）
弃旧培养基，PBS（无Ca²⁺/Mg²⁺）润洗1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶1-2ml，37℃消化1-2分钟（镜下观察细胞变圆后终止）。
加入新鲜培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液。
按1:2至1:3比例分瓶，原培养基对比培养以评估适应性。
注意事项
稳定性监测：EGFP/LUC表达需定期验证（如荧光显微镜或流式细胞术）。
污染防控：严格无菌操作，建议使用原厂配套培养基减少适应性差异。
实验建议：传代后24小时内避免处理，确保细胞贴壁恢复。
应用提示
活体成像：接种裸鼠前需确认荧光素酶活性（如D-荧光素钾盐底物）。
文献参考：建议查阅ATCC或相关论文获取特定实验参数（如接种密度、药物处理浓度）。
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