柠檬酸(CA)含量测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
CA 是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA 是三羧酸循环第一步反应的产物。
测定原理:
酸性条件下,柠檬酸还原 Cr6+生成 Cr3+ ,在 545nm 处有特征吸收峰;通过测定 545nm 吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。测定操作:1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ,调节波长到 545 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一置于 30℃水浴中预热 30min。
3. 空白管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 蒸馏水,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,混匀后室温静置 30min ,于 545nm 测定吸光度,记为 A 空白管。
4. 标准管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 标准液,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,混匀后室温静置 30min ,于 545nm 测定吸光度,记为 A 标准管。
5. 测定管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 上清液,140μL 试剂一,20μL 试剂四,20μL 试剂五,充分混匀后室温静置 30min ,于 545nm 测定吸光度,记为 A 测定管。
注 意:
空白管和标准管只需测定一次。
上海酶联生物科技有限公司
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