3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶,广泛存在于动植物和微生物体内,催化 1,3-二磷酸甘油酸转变为 3-磷酸甘油酸,产生 1 分子 ATP,具有影响 DNA 复制和修补及刺激病毒 RNA 合成等生物学功能,广泛应用于药物靶标设计。
测定原理:
3-磷酸甘油酸激酶催化 3-磷酸甘油酸和 ATP 产生 1,3-二磷酸甘油酸和 ADP,1,3-二磷酸甘油酸在 3-磷酸甘油醛脱氢酶和 NADH 作用下产生 3-磷酸甘油醛、NAD 和磷酸,340nm 处的吸光度变化反映了 3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿。测定操作:1. 分光光度计预热 30min ,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2. 取 1mL 石英比色皿,依次加入 500μL 试剂一,100μL 试剂二,50μ L 试剂三,50μ L 试剂四,200μ L 试剂五,100μL 粗酶液,充分混匀,记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2,△A=A1-A2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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