磷酸丙糖异构酶(TPI)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
植物叶绿体中磷酸丙糖异构酶是光合作用中参与 calvin 循环的重要酶。作用于磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮之间的转化,磷酸二羟丙酮能快速透过叶绿体的包膜进入细胞质,并在其中逐步转化为蔗糖。
测定原理:
磷酸丙糖异构酶将磷酸二羟丙酮转化为 3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛与 NAD 在 3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用下生成 3-磷酸甘油酸和 NADH ,340nm 处的吸光度变化反映了磷酸丙糖异构酶的活性的高低。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、研钵、震荡仪、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿。测定操作:
1. 分光光度计预热 30min ,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2. 取 1mL 石英比色皿,依次加入 600μL 试剂一,100μ L 试剂二,100μ L 试剂三,100μ L 试剂四,100μ L 粗酶液,充分混匀,记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2,△A=A2-A1。注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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