乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒/微量法/96S

乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

AchE 属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE 催化乙酰胆碱（Ach）水解，在神经传导调节中起重要作用。

测定原理：

AchE 催化 Ach 水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸（DTNB）作用生成 5-巯基-硝基苯甲酸（TNB）； TNB 在 412nm 处有吸收峰，通过测定 412 nm 吸光度增加速率，计算 AchE 活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 412 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30min。

3. 取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 20μL 上清液、160 μL 试剂二、10μL 试剂三和 10μL 试剂四，迅速混匀，于 412nm 处测定3min 内吸光值变化，第 10s 吸光值记为 A1 ，第 190s 吸光值记为 A2 。△A 测定管 =A2-A1。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。